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[급]Tris-Hcl Buffer를 사용해도 될까요?

2008-03-17 org.kosen.entty.User@515bd65 박재일(jaeil7)
  • 3
pH 8 pH 8.5 pH 9 pH 9.5 pH 10 1)위의 5개 pH 범위에 속하는 Buffer로 Tris-Hcl buffer사용해도 무관하겠습니까? 2) 70mM Tris-Hcl Buffer를 제조하는 방법은 무엇인가요? - 제가알고있는 제조법(정확하지 않은거 같아요^^) 70mM Tris 를 만들어 진한 HCL(12N,원액)을 이용하여 각각의 pH를 적정! 답변좀 부탁드립니다..
  • Tris-Hcl
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답변 3
  • 답변

    장성재님의 답변

    2008-03-18
    • 0
    Tris-HCl buffer의 buffer capacity는 대략 pH 7.0에서 9.0정도 일때 최적입니다. 님께선 pH 8.0에서 10정도를 원하시므로, boric acid-NaOH buffer가 적당할 듯 싶네요. buffer 만드는 법은 간단하게 만들고자 하는 절반 부피의 2배 농도 약산(또는 염기)용액에 같은 농도의 강산(또는 염기)를 이용하셔서 pH를 보정 후 나머지 부피를 물로 채워주시면 됩니다. 70 mM Tris 100mL를 만들 경우 140 mM Tris용액 50mL에 140 mM HCl를 가하여 pH를 보정 후 남은 부피만큼 증류수를 넣어주시면 됩니다.
    답변수정
    Tris-HCl buffer의 buffer capacity는 대략 pH 7.0에서 9.0정도 일때 최적입니다. 님께선 pH 8.0에서 10정도를 원하시므로, boric acid-NaOH buffer가 적당할 듯 싶네요. buffer 만드는 법은 간단하게 만들고자 하는 절반 부피의 2배 농도 약산(또는 염기)용액에 같은 농도의 강산(또는 염기)를 이용하셔서 pH를 보정 후 나머지 부피를 물로 채워주시면 됩니다. 70 mM Tris 100mL를 만들 경우 140 mM Tris용액 50mL에 140 mM HCl를 가하여 pH를 보정 후 남은 부피만큼 증류수를 넣어주시면 됩니다.
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  • 답변

    JS님의 답변

    2008-03-19
    • 0
    1번은 pH9이상에는 다른 버퍼를 사용하는게 좋을거 같은데요, 사실 9.5까지는 그냥 사용해도 될거 같구요. 실제로 10도 가능할거 같습니다. 70 mM tris-HCl 버퍼 100mL 만드는 방법은 먼저, 계산을 하면 0.07 M * 0.1 L * 분자량 = x.00 g (= X 라고 합시다) 이 됩니다. X g을 먼저 100mL이하 (약 80mL)에서 증류수에 완전히 녹인후 pH미터를 이용하여 원하시는 pH 로 맞추면 됩니다. 처음 pH전극을 담그면 약간 pH 10.0보다 높게 나오는게 정상입니다. 그러면 원하시는 농도로 HCl을 이용하여 맞추면 되겠지요. 아마도 12N HCl (시중에 파는 실험실용 염산의 농도는 모두 12 N 입니다, 물론 다른 농도의 염산도 팝니다.)을 조금만 titration해도 금방 변하니까 살살 하시구요. 그런다음 정확히 부피가 100 mL가 되게 증류수로 mess up하면 되겠지요. 참고로, tris는 HCl 아니면, H2SO4로 적정하는데 주로 Cl- 이온의 방해가 있으면 H2SO4로 쓰구요. 반대로 SO42- 방해가 있으면 HCl로 사용합니다. >pH 8 >pH 8.5 >pH 9 >pH 9.5 >pH 10 > >1)위의 5개 pH 범위에 속하는 Buffer로 Tris-Hcl buffer사용해도 무관하겠습니까? > >2) 70mM Tris-Hcl Buffer를 제조하는 방법은 무엇인가요? > >- 제가알고있는 제조법(정확하지 않은거 같아요^^) >70mM Tris 를 만들어 진한 HCL(12N,원액)을 이용하여 각각의 pH를 적정! > >답변좀 부탁드립니다..
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    1번은 pH9이상에는 다른 버퍼를 사용하는게 좋을거 같은데요, 사실 9.5까지는 그냥 사용해도 될거 같구요. 실제로 10도 가능할거 같습니다. 70 mM tris-HCl 버퍼 100mL 만드는 방법은 먼저, 계산을 하면 0.07 M * 0.1 L * 분자량 = x.00 g (= X 라고 합시다) 이 됩니다. X g을 먼저 100mL이하 (약 80mL)에서 증류수에 완전히 녹인후 pH미터를 이용하여 원하시는 pH 로 맞추면 됩니다. 처음 pH전극을 담그면 약간 pH 10.0보다 높게 나오는게 정상입니다. 그러면 원하시는 농도로 HCl을 이용하여 맞추면 되겠지요. 아마도 12N HCl (시중에 파는 실험실용 염산의 농도는 모두 12 N 입니다, 물론 다른 농도의 염산도 팝니다.)을 조금만 titration해도 금방 변하니까 살살 하시구요. 그런다음 정확히 부피가 100 mL가 되게 증류수로 mess up하면 되겠지요. 참고로, tris는 HCl 아니면, H2SO4로 적정하는데 주로 Cl- 이온의 방해가 있으면 H2SO4로 쓰구요. 반대로 SO42- 방해가 있으면 HCl로 사용합니다. >pH 8 >pH 8.5 >pH 9 >pH 9.5 >pH 10 > >1)위의 5개 pH 범위에 속하는 Buffer로 Tris-Hcl buffer사용해도 무관하겠습니까? > >2) 70mM Tris-Hcl Buffer를 제조하는 방법은 무엇인가요? > >- 제가알고있는 제조법(정확하지 않은거 같아요^^) >70mM Tris 를 만들어 진한 HCL(12N,원액)을 이용하여 각각의 pH를 적정! > >답변좀 부탁드립니다..
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  • 답변

    이영삼님의 답변

    2008-03-19
    • 0
    다음의 사이트에서 각 pH 별로 적합한 버퍼를 확인할 수 있습니다. http://www.sigmaaldrich.com/Area_of_Interest/Biochemicals/Buffer_Explorer/Key_Resources/Buffer_Reference_Center.html 위의 사이트에서 Trizma 버퍼로 나와있는 것이 Tris버퍼 입니다. >pH 8 >pH 8.5 >pH 9 >pH 9.5 >pH 10 > >1)위의 5개 pH 범위에 속하는 Buffer로 Tris-Hcl buffer사용해도 무관하겠습니까? > >2) 70mM Tris-Hcl Buffer를 제조하는 방법은 무엇인가요? > >- 제가알고있는 제조법(정확하지 않은거 같아요^^) >70mM Tris 를 만들어 진한 HCL(12N,원액)을 이용하여 각각의 pH를 적정! > >답변좀 부탁드립니다..
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    다음의 사이트에서 각 pH 별로 적합한 버퍼를 확인할 수 있습니다. http://www.sigmaaldrich.com/Area_of_Interest/Biochemicals/Buffer_Explorer/Key_Resources/Buffer_Reference_Center.html 위의 사이트에서 Trizma 버퍼로 나와있는 것이 Tris버퍼 입니다. >pH 8 >pH 8.5 >pH 9 >pH 9.5 >pH 10 > >1)위의 5개 pH 범위에 속하는 Buffer로 Tris-Hcl buffer사용해도 무관하겠습니까? > >2) 70mM Tris-Hcl Buffer를 제조하는 방법은 무엇인가요? > >- 제가알고있는 제조법(정확하지 않은거 같아요^^) >70mM Tris 를 만들어 진한 HCL(12N,원액)을 이용하여 각각의 pH를 적정! > >답변좀 부탁드립니다..
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