지식나눔

hydroxyl radical 만 측정할수 있는 방법은 없나요?

ROS의 양을 FACS를 통해 측정할때 주로 H2DCFDA dye를 사용하는 것으로 알고 있습니다. 이 dye를 사용할 경우 hydrogen peroxide와 강하게 반응하고 약하지만 hydroxyl radical과도 반응하는 것으로 나와있는데,ROS 중에서도 hydroxyl radical의 양만 측정할 수 있는 방법은 없는지 알고 싶습니다.(가능하면 FACS 분석으로)
  • hydroxyl radical
  • FACS
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답변 1
  • 답변

    장병기님의 답변

    DCFDA 가 H2O2 와 direct 하게 반응하는 것은 아닌 것으로 알고 있습니다. H2O2 를 기질로 사용하는 물질들(peroxidase)이 H2O2 를 분해하면서 생기는 산화물과 H2DCFDA (이것도 아마 NaOH 로 가수분해시켜 DCFH 가 되면 이것을 사용하겠죠? 오래되서 기억이 안나는군요) 와 반응하여 DCF 가 형광을 나타내는 원리인거 같습니다. FACS 로 HO radical 만을 측정하는 방법은 저도 보지 못했습니다. 아마도 HO radical 의 반감기가 매우 짧기 때문일듯 하고, 이것만을 잡아 형광을 띨수 있는 물질이 아직은 없을 듯 합니다. 3-4년전까지 하더라도 없었던거 같은데 어디까지나 제 생각입니다. 지금은 많은 probe 가 개발되어 있을수도 있습니다. Specific 하게 HO radical 만을 검출하는 방법으로는 ESR(electron spin resornance) 또는 EPR 이라고도 하는 장비를 이용하면 측정할 수 있습니다. >ROS의 양을 FACS를 통해 측정할때 주로 H2DCFDA dye를 사용하는 것으로 알고 있습니다. >이 dye를 사용할 경우 hydrogen peroxide와 강하게 반응하고 약하지만 hydroxyl radical과도 반응하는 것으로 나와있는데,ROS 중에서도 hydroxyl radical의 양만 측정할 수 있는 방법은 없는지 알고 싶습니다.(가능하면 FACS 분석으로)
    DCFDA 가 H2O2 와 direct 하게 반응하는 것은 아닌 것으로 알고 있습니다. H2O2 를 기질로 사용하는 물질들(peroxidase)이 H2O2 를 분해하면서 생기는 산화물과 H2DCFDA (이것도 아마 NaOH 로 가수분해시켜 DCFH 가 되면 이것을 사용하겠죠? 오래되서 기억이 안나는군요) 와 반응하여 DCF 가 형광을 나타내는 원리인거 같습니다. FACS 로 HO radical 만을 측정하는 방법은 저도 보지 못했습니다. 아마도 HO radical 의 반감기가 매우 짧기 때문일듯 하고, 이것만을 잡아 형광을 띨수 있는 물질이 아직은 없을 듯 합니다. 3-4년전까지 하더라도 없었던거 같은데 어디까지나 제 생각입니다. 지금은 많은 probe 가 개발되어 있을수도 있습니다. Specific 하게 HO radical 만을 검출하는 방법으로는 ESR(electron spin resornance) 또는 EPR 이라고도 하는 장비를 이용하면 측정할 수 있습니다. >ROS의 양을 FACS를 통해 측정할때 주로 H2DCFDA dye를 사용하는 것으로 알고 있습니다. >이 dye를 사용할 경우 hydrogen peroxide와 강하게 반응하고 약하지만 hydroxyl radical과도 반응하는 것으로 나와있는데,ROS 중에서도 hydroxyl radical의 양만 측정할 수 있는 방법은 없는지 알고 싶습니다.(가능하면 FACS 분석으로)
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