2008-04-03
org.kosen.entty.User@afadea4
김영진(dudwls0908)
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실험에서 antibody 를 추출하는 중인데
elution 이끈난뒤에는 10ml가 남았구요
그안에 들어있는 0.1M의 glycine을 dailysis로 제거하려하는데
glycine 가 1nM 이하로 남아있으면 제거되었다고 생각할때
PBS 1L 로 몇번을 dailysis 해야되는지 궁금합니다
- dailysis
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답변 1
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답변
심용호님의 답변
2008-04-04- 0
glycine을 직접 제거해 본 적은 없지만... Dialysis tubing의 성능에 조금씩 차이가 있고요 (확산 시간 등) 혼합물에 따라서 조금씩 차이가 있을수 있고요. 바람직하게는 완료후 분석/확인을 통해서 적어도 한번의 프로토콜을 세워놓는게 좋습니다. 유사한 프로토콜이 있으면 더 좋고요. 기본적으로 10mL에 0.1M 이 남았고, 1nM로 내리겠다면, 쉽게 말해서 100 000 mL 에 담가놓고 정제하면 됩니다. 내부의 농도와 외부의 농도가 같아지는 순간 전체적인 용액의 농도가 1nM 가 되니까 그냥 꺼내면 됩니다. 더 확실하게 하기 위해서 1000mL 에 6시간, 다시 새로운 1000mL 에 6시간, 마지막으로 1000mL 에 6시간.. 그럼 0.1pM 수준이 되니까 충분할 것입니다. 그래도 한번은 분석을 통해서 농도를 확인하시고, 위의 프로토콜을 세팅해 놓으면 될것입니다. (필요에 따라서는 12시간 마다 바꾸거나, 3시간 마다 500mL을 바꾸거나 하는 경우도 있습니다.) 도움이 되셨기를... >실험에서 antibody 를 추출하는 중인데 >elution 이끈난뒤에는 10ml가 남았구요 >그안에 들어있는 0.1M의 glycine을 dailysis로 제거하려하는데 >glycine 가 1nM 이하로 남아있으면 제거되었다고 생각할때 >PBS 1L 로 몇번을 dailysis 해야되는지 궁금합니다 > >