지식나눔

웨스턴 전기영동 로딩했을때

sds 전기영동을 하려고 겔을 만들어 시료를 넣고 15mA로 전기를 걸어줬는데 lane 홈에서 전혀 움직이질 않아요 왜 그럴까요? 뭐에 문제가 있는것인지 애타요 정말 몇번째인지 몰라요 ㅠㅠ 웨스턴을 해본 사람이 전혀 없어서 물어볼 수도 없어 정말 죽갔습니다. ㅠㅠ 성실한 답변 풀즈입니다.
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    김중재님의 답변

    말씀하신 문제는 웨스턴과는 상관없는 단계의 문제네요. 단시 SDS-PAGE 에 문제가 있는 것이니 PAGE 해 본 선배에게 문의해도 될 듯 싶습니다. 그리고, Power 를 넣고 buffer 에 bubble 이 뽀골뽀골 올라오는지 확인해 보세요. bubble 이 올라 오지 않으면, 전극이 끊어졌거나 어딘가의 접촉 불량입니다. 한 번 확인해 보세요. >sds 전기영동을 하려고 >겔을 만들어 시료를 넣고 >15mA로 전기를 걸어줬는데 >lane 홈에서 전혀 움직이질 않아요 >왜 그럴까요? >뭐에 문제가 있는것인지 >애타요 정말 >몇번째인지 몰라요 ㅠㅠ >웨스턴을 해본 사람이 전혀 없어서 >물어볼 수도 없어 >정말 죽갔습니다. ㅠㅠ >성실한 답변 풀즈입니다.
    말씀하신 문제는 웨스턴과는 상관없는 단계의 문제네요. 단시 SDS-PAGE 에 문제가 있는 것이니 PAGE 해 본 선배에게 문의해도 될 듯 싶습니다. 그리고, Power 를 넣고 buffer 에 bubble 이 뽀골뽀골 올라오는지 확인해 보세요. bubble 이 올라 오지 않으면, 전극이 끊어졌거나 어딘가의 접촉 불량입니다. 한 번 확인해 보세요. >sds 전기영동을 하려고 >겔을 만들어 시료를 넣고 >15mA로 전기를 걸어줬는데 >lane 홈에서 전혀 움직이질 않아요 >왜 그럴까요? >뭐에 문제가 있는것인지 >애타요 정말 >몇번째인지 몰라요 ㅠㅠ >웨스턴을 해본 사람이 전혀 없어서 >물어볼 수도 없어 >정말 죽갔습니다. ㅠㅠ >성실한 답변 풀즈입니다.
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    김영미님의 답변

    15mA 대신 80V 로 해보시는게 어떨지요?? 보통 stacking gel은 80v로 내린 후 running gel에선 100-110v 정도로 내리거든요... 파워서플라이에 80v로 한꺼번에 두개를 전기영동하면 보통 80-90mA 정도 걸리는데..모 이건 버퍼의 상태나 여러상황에 따라 달라질 수 있지만요... 도움이 ?瑛만?좋겠네요.. 참..샘플의 상태에 따라서 전기영동이 잘 안되는 경우도 있습니다. lysis 가 충분히 되었는지도 확인해보시는게 좋을 듯 하네요. 그럼..좋은 하루 되세요..^^*
    15mA 대신 80V 로 해보시는게 어떨지요?? 보통 stacking gel은 80v로 내린 후 running gel에선 100-110v 정도로 내리거든요... 파워서플라이에 80v로 한꺼번에 두개를 전기영동하면 보통 80-90mA 정도 걸리는데..모 이건 버퍼의 상태나 여러상황에 따라 달라질 수 있지만요... 도움이 ?瑛만?좋겠네요.. 참..샘플의 상태에 따라서 전기영동이 잘 안되는 경우도 있습니다. lysis 가 충분히 되었는지도 확인해보시는게 좋을 듯 하네요. 그럼..좋은 하루 되세요..^^*
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