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지식나눔

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돼지모근에서 dna 분리하는 방법은 어떤게 있을까요?

2008-04-28 org.kosen.entty.User@767d6bc0 강진훈(npok)
  • 1
제가 돼지모근에서 dna를 분리 하는데 깨끗하지 가 못하여 그럽니다 다른 방법이 있으시다면 부？ 드립니다.
  • dna
  • hair root
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답변 1
  • 답변

    장병기님의 답변

    2008-04-28
    • 0
    어떤 방법으로 뽑으시나요? genomic DNA 뽑으시는 거죠? 해봐야 알게쓰나 20 mM Tris-Cl pH 8.0 5 mM EDTA 400 mM NaCl 1% SDS buffer + 400ug/ml 농도되게 Proteinase K 넣으시고 모근이 얼마나 양이 될런지는 모르겠으나 양은 수십 mg 이라면 대충 버퍼 0.5 ml 과 혼합하여 (모근 양이 적으시면 적당히 양을 더 줄이시고...) 55도에서 shaking 오버나잇 해주시고, phenol:chloroform:isoamyl alcohol(혼합된거 팝니다) 을 0.5 ml 혼합 후 30 분간 room temp. 에서 rocking 해주시고 5분간 microcentrifuge 로 10000-14000 rpm 돌린 후 상층액 조심스레 따시고 따신 양 만큼 isopropanol 로 DNA 침전시키시고 13000 X g 로 4도에서 15분 centri. isopropanol 제거, 70% ethanol 로 워싱.. 다시 centri.. DNA 잘 말리시고 적정양 dH2O 넣어서 녹여주시면 될듯합니다. >제가 돼지모근에서 dna를 분리 하는데 깨끗하지 가 못하여 그럽니다 >다른 방법이 있으시다면 부？ 드립니다.
    답변수정
    어떤 방법으로 뽑으시나요? genomic DNA 뽑으시는 거죠? 해봐야 알게쓰나 20 mM Tris-Cl pH 8.0 5 mM EDTA 400 mM NaCl 1% SDS buffer + 400ug/ml 농도되게 Proteinase K 넣으시고 모근이 얼마나 양이 될런지는 모르겠으나 양은 수십 mg 이라면 대충 버퍼 0.5 ml 과 혼합하여 (모근 양이 적으시면 적당히 양을 더 줄이시고...) 55도에서 shaking 오버나잇 해주시고, phenol:chloroform:isoamyl alcohol(혼합된거 팝니다) 을 0.5 ml 혼합 후 30 분간 room temp. 에서 rocking 해주시고 5분간 microcentrifuge 로 10000-14000 rpm 돌린 후 상층액 조심스레 따시고 따신 양 만큼 isopropanol 로 DNA 침전시키시고 13000 X g 로 4도에서 15분 centri. isopropanol 제거, 70% ethanol 로 워싱.. 다시 centri.. DNA 잘 말리시고 적정양 dH2O 넣어서 녹여주시면 될듯합니다. >제가 돼지모근에서 dna를 분리 하는데 깨끗하지 가 못하여 그럽니다 >다른 방법이 있으시다면 부？ 드립니다.
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