지식나눔

DNA extraction에서,,

DNA extraction을 하였는데요,, 3M NaAc,ph5.2를 0.3M이 되도록 넣어주고 Isopropanol을 넣어주면 하얗게 DNA가 관찰되잖아요,, 그런데 이것을 바로 ethanol 처리를 하지않고 -20도씨에 overnight 하면 DNA의 침전이 더 잘 되는 것으로 알고있는데,, 이상하게 overnight 하고 난 후 하얗게 보이던 pellet의 양이 처음보다 줄어든 것 같아요,, 혹시,, -20도에서의 incubation time에 따라서 DNA의 침전율이 달라진다는,,그런 말이 있을까 해서 질문드립니다. 가령,,incubation time이 너무 길어도 DNA의 침전율이 낮아진다거나,,하는식의 이야기들,,ㅎㅎ 답변 부탁드립니다. ^^
  • DNA
  • 추출
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답변 1
  • 답변

    한명국님의 답변

    DNA을 추출할때 사용하는 용매(ethanol, isoparopanol), 온도(-20C or -70C), 반응시간(최소 2시간, overnight)에 따라 침전되는 DNA양에 다소 차이는 있습니다(발표된 논문있음). 그러나 -70C에서 최소 2시간 이상, -20C에서는 overnight 침전하고 정확하게 ethanol(2 vol) 또는 isopropanol (1 vol)의 양을 사용하면 별 차이는 없습니다. 사용한 방법에 따른 DNA 추출양은 농도정량을 통해 확인해 보시는 것도 좋은 방법이 되겠습니다. 보다 자세한 내용은 논문을 검색해 보세요. 저 기억으로는 궁금해 하는 내용에 대한 명확한 답변을 줄것입니다. DNA 추출시 더 중요한 것은 피펫팅에 의해 DNA가 분절되지 않도록 하는 것입니다.
    DNA을 추출할때 사용하는 용매(ethanol, isoparopanol), 온도(-20C or -70C), 반응시간(최소 2시간, overnight)에 따라 침전되는 DNA양에 다소 차이는 있습니다(발표된 논문있음). 그러나 -70C에서 최소 2시간 이상, -20C에서는 overnight 침전하고 정확하게 ethanol(2 vol) 또는 isopropanol (1 vol)의 양을 사용하면 별 차이는 없습니다. 사용한 방법에 따른 DNA 추출양은 농도정량을 통해 확인해 보시는 것도 좋은 방법이 되겠습니다. 보다 자세한 내용은 논문을 검색해 보세요. 저 기억으로는 궁금해 하는 내용에 대한 명확한 답변을 줄것입니다. DNA 추출시 더 중요한 것은 피펫팅에 의해 DNA가 분절되지 않도록 하는 것입니다.
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