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지식나눔

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transformation시 b-mercaptoethnol을 넣어주는 이유가 무엇인가요??

2008-05-16 org.kosen.entty.User@1eeddf7f 안선영(asan135)
  • 1
E.coli BL21 시리즈 프로토콜을 보면, transformation 할때 b(베타)-mercaptoethnol을 넣어주라고 하던데요.. 넣어주면 transformation의 효율이 2~3배증가한다고 하던데.. 어째서 그런건가요??
  • transformation
  • b-mercaptoethnol
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답변 1
  • 답변

    장성재님의 답변

    2008-05-16
    • 0
    질문하신 내용에 대해 정확한 답변을 드릴 수는 없지만, 아시다시피 beta-mercaptoethnol은 강력한 환원제로써 E.coli의 막단백질들의 disulfide bond를 파괴하여 단백질의 활성을 저해할 수 있습니다. E.coli의 periplasm 내에 대량으로 존재하는 DNase를 불활성화시킬 수도 있겠지요. 또한, beta-ME가 세포벽 자체의 rigidity를 변하게 한다고도 합니다. beta-ME 이외에도 DTT나 glutathion도 transformation 효율을 증가시킨다는 보고들도 있습니다. E.coli 이외에도 yeast의 경우도 beta-mercaptoethnol에 의해 transformation 효율이 증가한다는 보고가 있습니다. >E.coli BL21 시리즈 프로토콜을 보면, > >transformation 할때 b(베타)-mercaptoethnol을 넣어주라고 하던데요.. > >넣어주면 transformation의 효율이 2~3배증가한다고 하던데.. > >어째서 그런건가요??
    답변수정
    질문하신 내용에 대해 정확한 답변을 드릴 수는 없지만, 아시다시피 beta-mercaptoethnol은 강력한 환원제로써 E.coli의 막단백질들의 disulfide bond를 파괴하여 단백질의 활성을 저해할 수 있습니다. E.coli의 periplasm 내에 대량으로 존재하는 DNase를 불활성화시킬 수도 있겠지요. 또한, beta-ME가 세포벽 자체의 rigidity를 변하게 한다고도 합니다. beta-ME 이외에도 DTT나 glutathion도 transformation 효율을 증가시킨다는 보고들도 있습니다. E.coli 이외에도 yeast의 경우도 beta-mercaptoethnol에 의해 transformation 효율이 증가한다는 보고가 있습니다. >E.coli BL21 시리즈 프로토콜을 보면, > >transformation 할때 b(베타)-mercaptoethnol을 넣어주라고 하던데요.. > >넣어주면 transformation의 효율이 2~3배증가한다고 하던데.. > >어째서 그런건가요??
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