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지식나눔

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DNA 흡광도 측정

2008-05-22 org.kosen.entty.User@b683ac6 이수희(twozmun)
  • 1
안녕하세요. 제가 E.coli cell을 lysis했는데. DNA가 잘 정연된 상태냐 아니면 유리된 상태냐에 따라 OD값이 달라진다고 하던데. 그렇다면 DNAse를 처리하더라도 DNA가 완전히 분해되어 없어지는건 아니니 260에서 흡광이 그대로 나타나는건가요? 다만 OD의 값만이 달라지는건지. 혹시 흡광이 안나오게 DNA만 완전히 분해시키는 방법은 없을까요? protein에는 영향이 미치지 않았으면 하는데.
  • DNA absorbance
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답변 1
  • 답변

    박재영님의 답변

    2008-07-10
    • 0
    A260/A280 값으로 순도를 알수 있습니다. A260값은 DNA의 흡광도이고 A280값은 단백질이나 기타 잡물질의 흡광도 입니다. A260/A280 = 1.8일때 순수한 DNA라고 보며 1.8이하라면 순수하지 않다고 할수 있습니다. 그 값을 바탕으로 정량하실때는 A260 = 1 일때, DNA 농도가 50ug/ml 이며 구하신 값이랑 비례식을 사용하시면 DNA농도를 아실 수 있습니다. 그렇게 농도를 구하신 후에 이미 농도를 알고 있는 다른 DNA와 함께 동일량의 DNA를 agarose gel electrophoresis에 러닝하셔서 육안상으로 동일량인지 확인해 보시는 편도 좋습니다.
    답변수정
    A260/A280 값으로 순도를 알수 있습니다. A260값은 DNA의 흡광도이고 A280값은 단백질이나 기타 잡물질의 흡광도 입니다. A260/A280 = 1.8일때 순수한 DNA라고 보며 1.8이하라면 순수하지 않다고 할수 있습니다. 그 값을 바탕으로 정량하실때는 A260 = 1 일때, DNA 농도가 50ug/ml 이며 구하신 값이랑 비례식을 사용하시면 DNA농도를 아실 수 있습니다. 그렇게 농도를 구하신 후에 이미 농도를 알고 있는 다른 DNA와 함께 동일량의 DNA를 agarose gel electrophoresis에 러닝하셔서 육안상으로 동일량인지 확인해 보시는 편도 좋습니다.
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