2008-05-30
org.kosen.entty.User@2da2321
정자영(wkdud218)
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안녕하세요 제가 학부생이라 지식이 없어서 질문좀드리겠습니다 ㅠㅠ
전공실험에서 TCL를 하였는데요, 전개용매로는 chloroform:mathanol 7:3
사용하였구요 시약은 당단백질이용하였습니다, 고정상은 실리카겔 사용하였구요,
그런데 결과를보니까, 똑같은 당단백질인데도 band가 Rf값이 다르게나왔어요;;
아래쪽엔 끌림현상도 일어났구요;책에는 다 원리같은거밖에 나오질 않아서요 ㅠ
그리고 실리카겔 맨위에 BAND도 아니고 끌려서 나타나는건,
뭘까요ㅠ남은잔해인가요? 남은잔해라면 극성이 높은잔해들인가요?
또..어두운색깔은 왜저렇게 나타나고, 밝은색은 왜저렇게나타나는건가요..?
기본질문해서 죄송합니다 ㅠㅠㅠ 좋은하루되시구요! 답변부탁드려요 ~~
- TLC
- Rf
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
이상후님의 답변
2008-05-30- 0
>안녕하세요 제가 학부생이라 지식이 없어서 질문좀드리겠습니다 ㅠㅠ >전공실험에서 TCL를 하였는데요, 전개용매로는 chloroform:mathanol 7:3 >사용하였구요 시약은 당단백질이용하였습니다, 고정상은 실리카겔 사용하였구요, >그런데 결과를보니까, 똑같은 당단백질인데도 band가 Rf값이 다르게나왔어요;; >아래쪽엔 끌림현상도 일어났구요;책에는 다 원리같은거밖에 나오질 않아서요 ㅠ >그리고 실리카겔 맨위에 BAND도 아니고 끌려서 나타나는건, >뭘까요ㅠ남은잔해인가요? 남은잔해라면 극성이 높은잔해들인가요? >또..어두운색깔은 왜저렇게 나타나고, 밝은색은 왜저렇게나타나는건가요..? > >기본질문해서 죄송합니다 ㅠㅠㅠ 좋은하루되시구요! 답변부탁드려요 ~~ 우선 Rf value가 다른 이유는 tlc solvent가 제대로 saturation이 되지 않으면 이런 현상이 나타나거나 chamber의 sealing이 제대로 되지 않을 경우에도 나타날수 있습니다. 용매가 전개되면서 vapor가 증발되어서 조성 비율이 변하게 되면 Rf value가 약간씩 달라질 수 있습니다. 그리고 윗부분에 diffusion된 피크들은 질문자분께서 사용한 용매에 당단백질의 일부분이 녹지 않아서 생길 수 있습니다. 지금상황으로는 친수성 물질인듯 보입니다. 어두운 색과 밝은색은 charring하실때 균질하게 태워지지 않아서 그렇습니다. -
답변
문형인님의 답변
2008-05-31- 0
실리카겔과 당단백질에서 당과 단백질의 전하와 실리카겔이 흡착을 일으키므로 일어 나는 현상입니다. 그러므로 현재의 이동상에서 파스테르피펫으로 초산 한방울(acetic acid)을 떨어뜨려서 다시 전개하면 끌림현상은 거의 없어 질것입니다.