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LC/MS 분석시,,

궁금한게 있는데요, LC 나,LC/MS 분석할때 positive 혹은 negative ion mode 를 정해놓고 분석을 하게 되잖아요, 저 같은 경우는 보통 paper에 의존해서 ion mode 를 정하는데, 이때 positive or negative mode는 그 화합물이 띄는 이온성을 고려 해서 결정하는것인가요?? 이 기기에서 positive or negative 가 의미하는 것이 무엇인지 궁금합니다, 답변 부탁드리겠습니다.
  • LC
  • mass
  • positive
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    이상후님의 답변

    >궁금한게 있는데요, > >LC 나,LC/MS 분석할때 > >positive 혹은 negative ion mode 를 정해놓고 분석을 >하게 되잖아요, > >저 같은 경우는 보통 paper에 의존해서 >ion mode 를 정하는데, > >이때 positive or negative mode는 > >그 화합물이 띄는 이온성을 고려 해서 결정하는것인가요?? > >이 기기에서 positive or negative 가 의미하는 것이 >무엇인지 궁금합니다, > >답변 부탁드리겠습니다. > > Positive ion mode나 negative ion mode는 대개 분석하고자 하는 물질의 이온화 성질에 따라 결정할 수 있습니다. Positive mode는 analyte로부터 proton을 하나 붙여서 + charge를 띄게 만들어서 detector에서 검출할 수 있으며, negative mode는 대개 acidic analyte의 경우에 proton을 하나 떼어내어 - charge로 만들어서 검출하게 됩니다. 보통 이온화는 ion source에 의해서 수행되는데 많이 사용되는 것이 ESI(electrospray)나 CI(chemical ionization)등이 있습니다.
    >궁금한게 있는데요, > >LC 나,LC/MS 분석할때 > >positive 혹은 negative ion mode 를 정해놓고 분석을 >하게 되잖아요, > >저 같은 경우는 보통 paper에 의존해서 >ion mode 를 정하는데, > >이때 positive or negative mode는 > >그 화합물이 띄는 이온성을 고려 해서 결정하는것인가요?? > >이 기기에서 positive or negative 가 의미하는 것이 >무엇인지 궁금합니다, > >답변 부탁드리겠습니다. > > Positive ion mode나 negative ion mode는 대개 분석하고자 하는 물질의 이온화 성질에 따라 결정할 수 있습니다. Positive mode는 analyte로부터 proton을 하나 붙여서 + charge를 띄게 만들어서 detector에서 검출할 수 있으며, negative mode는 대개 acidic analyte의 경우에 proton을 하나 떼어내어 - charge로 만들어서 검출하게 됩니다. 보통 이온화는 ion source에 의해서 수행되는데 많이 사용되는 것이 ESI(electrospray)나 CI(chemical ionization)등이 있습니다.
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    이종석님의 답변

    >궁금한게 있는데요, > >LC 나,LC/MS 분석할때 > >positive 혹은 negative ion mode 를 정해놓고 분석을 >하게 되잖아요, > >저 같은 경우는 보통 paper에 의존해서 >ion mode 를 정하는데, > >이때 positive or negative mode는 > >그 화합물이 띄는 이온성을 고려 해서 결정하는것인가요?? > >이 기기에서 positive or negative 가 의미하는 것이 >무엇인지 궁금합니다, > >답변 부탁드리겠습니다. > > LC-MS는 쉽게생각하면 기존 HPLC-UV 또는 PDA dector에 detector로 MS가 추가되었다고 보시면 될것입니다. 때문에 물질의 분리는 90%이상 HPLC가 좌우를 하고, 일부 2개이상의 물질이 coelution되더라도 분자량이 다르다면 MS에서 분리가 가능합니다. MS의 원리는 charge를 띄는 물질만 전기적으로 control하여 검출기까지 보내져 검출되어집니다. charge는 + ion 과 - ion 두가지가 있을수 있겠고, 각각의 이온은 원래의 분자구조에 proton이 하나 붙어서 +ion이 생성되고, proton이 하나 떨어져 나가서 -ion이 생성됩니다. 물론 2개, 3개 붙을수 있고, 단백질의 경우 수십개가 붙을수도 있습니다. 그래서 positive ion mode에서 분석된 물질은 [M+H]+로 나타나 기존의 분자량보다 1 큰값으로, negative ion mode에서 분석된 물질은 [M-H]-로 나타나 기존 분자량 보다 1 작은값으로 나타내어집니다. 원래부터 charge를 띄는 구조는 그대로 잡히기도 합니다. 또한 질량분석기에서 나타나는 값은 일반적인 분자량이 아니고, monoisotope molecular weight또는 exact mass값으로 나타납니다. 그래서 특정 동위원소를 구분가능하고, 더 나아가서 동위원소비율을 이용한 연대측정등도 가능한것이구요. Positive또는 negative의 선택은 분석물질을 이미 알고있다면, 대상 물질의 pKa값을 참고하시면 될것입니다. 이는 물질이 녹아있는 용액의 pH에 영향을 받으므로 결론적으로, solvent가 어떤 pH를 갖고있느냐가 중요합니다. 사용하시는 solvent와 어떤 첨가물질을 사용하느냐에따라서 같은 물질이라도 이온화 되는 경향이 달라집니다. 특히, 복잡한 샘플을 컬럼을 통해서 분리와 동시에 분석한다면 샘플내에 어떤 물질이 포함되어있을지 예상하기 어려우므로 하나의 분석물질에 적합한 조건만을 선택할수 고, 일반적으로 broad하게 검출될수있는 조건을 선택해야 할것입니다. 최근의 MS는 positive와 negative를 동시에 분석가능한 장비가 많습니다. 특히, ion trap 타입의 경우 각 모드(+/-)에서 full MS, MS2, MS3,...등을 동시에 수행할수도 있구요. 갖고계신 장비의 메뉴얼을 잘 살펴보시면 method 짤대 여러가지 실험을 수행할수 있을것입니다.
    >궁금한게 있는데요, > >LC 나,LC/MS 분석할때 > >positive 혹은 negative ion mode 를 정해놓고 분석을 >하게 되잖아요, > >저 같은 경우는 보통 paper에 의존해서 >ion mode 를 정하는데, > >이때 positive or negative mode는 > >그 화합물이 띄는 이온성을 고려 해서 결정하는것인가요?? > >이 기기에서 positive or negative 가 의미하는 것이 >무엇인지 궁금합니다, > >답변 부탁드리겠습니다. > > LC-MS는 쉽게생각하면 기존 HPLC-UV 또는 PDA dector에 detector로 MS가 추가되었다고 보시면 될것입니다. 때문에 물질의 분리는 90%이상 HPLC가 좌우를 하고, 일부 2개이상의 물질이 coelution되더라도 분자량이 다르다면 MS에서 분리가 가능합니다. MS의 원리는 charge를 띄는 물질만 전기적으로 control하여 검출기까지 보내져 검출되어집니다. charge는 + ion 과 - ion 두가지가 있을수 있겠고, 각각의 이온은 원래의 분자구조에 proton이 하나 붙어서 +ion이 생성되고, proton이 하나 떨어져 나가서 -ion이 생성됩니다. 물론 2개, 3개 붙을수 있고, 단백질의 경우 수십개가 붙을수도 있습니다. 그래서 positive ion mode에서 분석된 물질은 [M+H]+로 나타나 기존의 분자량보다 1 큰값으로, negative ion mode에서 분석된 물질은 [M-H]-로 나타나 기존 분자량 보다 1 작은값으로 나타내어집니다. 원래부터 charge를 띄는 구조는 그대로 잡히기도 합니다. 또한 질량분석기에서 나타나는 값은 일반적인 분자량이 아니고, monoisotope molecular weight또는 exact mass값으로 나타납니다. 그래서 특정 동위원소를 구분가능하고, 더 나아가서 동위원소비율을 이용한 연대측정등도 가능한것이구요. Positive또는 negative의 선택은 분석물질을 이미 알고있다면, 대상 물질의 pKa값을 참고하시면 될것입니다. 이는 물질이 녹아있는 용액의 pH에 영향을 받으므로 결론적으로, solvent가 어떤 pH를 갖고있느냐가 중요합니다. 사용하시는 solvent와 어떤 첨가물질을 사용하느냐에따라서 같은 물질이라도 이온화 되는 경향이 달라집니다. 특히, 복잡한 샘플을 컬럼을 통해서 분리와 동시에 분석한다면 샘플내에 어떤 물질이 포함되어있을지 예상하기 어려우므로 하나의 분석물질에 적합한 조건만을 선택할수 고, 일반적으로 broad하게 검출될수있는 조건을 선택해야 할것입니다. 최근의 MS는 positive와 negative를 동시에 분석가능한 장비가 많습니다. 특히, ion trap 타입의 경우 각 모드(+/-)에서 full MS, MS2, MS3,...등을 동시에 수행할수도 있구요. 갖고계신 장비의 메뉴얼을 잘 살펴보시면 method 짤대 여러가지 실험을 수행할수 있을것입니다.
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    안길홍님의 답변

    >궁금한게 있는데요,>>LC 나,LC/MS 분석할때 >>positive 혹은 negative ion mode 를 정해놓고 분석을 >하게 되잖아요,>>저 같은 경우는 보통 paper에 의존해서 >ion mode 를 정하는데,>>이때 positive or negative mode는 >>그 화합물이 띄는 이온성을 고려 해서 결정하는것인가요??>>이 기기에서 positive or negative 가 의미하는 것이 >무엇인지 궁금합니다,>>답변 부탁드리겠습니다. 첨부자료
    >궁금한게 있는데요,>>LC 나,LC/MS 분석할때 >>positive 혹은 negative ion mode 를 정해놓고 분석을 >하게 되잖아요,>>저 같은 경우는 보통 paper에 의존해서 >ion mode 를 정하는데,>>이때 positive or negative mode는 >>그 화합물이 띄는 이온성을 고려 해서 결정하는것인가요??>>이 기기에서 positive or negative 가 의미하는 것이 >무엇인지 궁금합니다,>>답변 부탁드리겠습니다. 첨부자료
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