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Nile red법을 이용하여 cell의 lipid 측정방법의 원리를 알려주세요.

cell의 lipid 방법 중에 nile red법을 알게되었는데 정확한 원리를 찾기 쉽지 않아 글을 올립니다. Nile red로 cell을 염색시 intracellular lipid에 염색된다고 하는데 그 원리를 알고 싶습니다. 간혹 Nile red가 cell 내부로 들어가 DNA와 같은 것에 염색되는지도 궁금하고요.. 감사합니다.
  • Nile red
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    이상후님의 답변

    >cell의 lipid 방법 중에 nile red법을 알게되었는데 정확한 원리를 찾기 쉽지 않아 글을 올립니다. > >Nile red로 cell을 염색시 intracellular lipid에 염색된다고 하는데 그 원리를 알고 싶습니다. > >간혹 Nile red가 cell 내부로 들어가 DNA와 같은 것에 염색되는지도 궁금하고요.. > >감사합니다. Nile red(9-diethylamino-5H- benzo[alpha]phenoxazine-5-one)는 intracellular lipid droplets의 검출시에 fluorescent vital stainning에 이용되는데, 특징적으로 유기용매에서는 매우 soluble하고 강하게 형광을 보입니다. Nile red의 excitation과 emission spectra가 solvent polarity 가 감소함에 따라서 더 짧은 파장대로 바뀌게 됩니다. 그런데 보통 형광성이 물 같은 수용성 미디어에서는 quenching되어지게 됩니다. 결과적으로 nile red가 lipid의 소수성 부분 특히,fatty acid chain과 반응하게 되면 hydrophobic interaction으로 마치 지방산 체인속에 파 뭏혀 버린 형태를 보이면서 강하게 형광성을 갖게 됩니다. 그래서 nile red가 뛰어난 fluorescent lipid probe로서 작용하게 됩니다. Nile red의 특성상 DNA의 hydrophobic region에서 binding 할 수 있습니다. 일부 논문상으로도 보고되어 있습니다.
    >cell의 lipid 방법 중에 nile red법을 알게되었는데 정확한 원리를 찾기 쉽지 않아 글을 올립니다. > >Nile red로 cell을 염색시 intracellular lipid에 염색된다고 하는데 그 원리를 알고 싶습니다. > >간혹 Nile red가 cell 내부로 들어가 DNA와 같은 것에 염색되는지도 궁금하고요.. > >감사합니다. Nile red(9-diethylamino-5H- benzo[alpha]phenoxazine-5-one)는 intracellular lipid droplets의 검출시에 fluorescent vital stainning에 이용되는데, 특징적으로 유기용매에서는 매우 soluble하고 강하게 형광을 보입니다. Nile red의 excitation과 emission spectra가 solvent polarity 가 감소함에 따라서 더 짧은 파장대로 바뀌게 됩니다. 그런데 보통 형광성이 물 같은 수용성 미디어에서는 quenching되어지게 됩니다. 결과적으로 nile red가 lipid의 소수성 부분 특히,fatty acid chain과 반응하게 되면 hydrophobic interaction으로 마치 지방산 체인속에 파 뭏혀 버린 형태를 보이면서 강하게 형광성을 갖게 됩니다. 그래서 nile red가 뛰어난 fluorescent lipid probe로서 작용하게 됩니다. Nile red의 특성상 DNA의 hydrophobic region에서 binding 할 수 있습니다. 일부 논문상으로도 보고되어 있습니다.
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    안길홍님의 답변

    >cell의 lipid 방법 중에 nile red법을 알게되었는데 정확한 원리를 찾기 쉽지 않아 글을 올립니다.>>Nile red로 cell을 염색시 intracellular lipid에 염색된다고 하는데 그 원리를 알고 싶습니다.>>간혹 Nile red가 cell 내부로 들어가 DNA와 같은 것에 염색되는지도 궁금하고요..>>감사합니다. 첨부자료
    >cell의 lipid 방법 중에 nile red법을 알게되었는데 정확한 원리를 찾기 쉽지 않아 글을 올립니다.>>Nile red로 cell을 염색시 intracellular lipid에 염색된다고 하는데 그 원리를 알고 싶습니다.>>간혹 Nile red가 cell 내부로 들어가 DNA와 같은 것에 염색되는지도 궁금하고요..>>감사합니다. 첨부자료
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