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DNA fragmentation assay

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안녕하세요 제가 요즘 apoptosis 연구하는데 DNA fragmentation assay를 진행하고 있는데요, 여러가지 방법을 사용해서 했는데 잘 되지가 않아서 이렇게 도움을 청하고자 글을 올립니다. 메뉴얼 방식으론 잘 되지 않아서 biovision에서 나온 kit를 사용해서 실험을 진행하였습니다. gel 사진을 2개 입니다. 두 사진 모두 다 양상은 사진에서 보이는 것처럼 smear하게 나옵니다. 첫번째 사진에서 DNA marker 옆에 있는 것이 negative control입니다. 나머지 두개는 5uM, 10uM 이렇게 농도를 달리해서 처리한 것이구요. 두번째 사진은 10uM을 처리한 농도의 사진입니다. 보시면 negative control까지 smear하게 나와서 어떻게 data를 해석해야할 지 모르겠습니다. necrosis인지 아니면 DNA 양이 많아서 그러는 건지. (cell 수를 5*106 정도 사용했습니다.) 고수님들의 답변을 부탁드립니다.
  • DNA
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  • fragmentation
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답변 1
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    안길홍님의 답변

    >안녕하세요>제가 요즘 apoptosis 연구하는데 DNA fragmentation assay를 진행하고 있는데요, 여러가지 방법을 사용해서 했는데 잘 되지가 않아서 이렇게 도움을 청하고자 글을 올립니다.>메뉴얼 방식으론 잘 되지 않아서 biovision에서 나온 kit를 사용해서 실험을 진행하였습니다.>gel 사진을 2개 입니다. 두 사진 모두 다 양상은 사진에서 보이는 것처럼 smear하게 나옵니다.>첫번째 사진에서 DNA marker 옆에 있는 것이 negative control입니다. 나머지 두개는 5uM, 10uM 이렇게 농도를 달리해서 처리한 것이구요.>두번째 사진은 10uM을 처리한 농도의 사진입니다.>보시면 negative control까지 smear하게 나와서 어떻게 data를 해석해야할 지 모르겠습니다.>necrosis인지 아니면 DNA 양이 많아서 그러는 건지. (cell 수를 5*106 정도 사용했습니다.)>고수님들의 답변을 부탁드립니다. 첨부자료
    >안녕하세요>제가 요즘 apoptosis 연구하는데 DNA fragmentation assay를 진행하고 있는데요, 여러가지 방법을 사용해서 했는데 잘 되지가 않아서 이렇게 도움을 청하고자 글을 올립니다.>메뉴얼 방식으론 잘 되지 않아서 biovision에서 나온 kit를 사용해서 실험을 진행하였습니다.>gel 사진을 2개 입니다. 두 사진 모두 다 양상은 사진에서 보이는 것처럼 smear하게 나옵니다.>첫번째 사진에서 DNA marker 옆에 있는 것이 negative control입니다. 나머지 두개는 5uM, 10uM 이렇게 농도를 달리해서 처리한 것이구요.>두번째 사진은 10uM을 처리한 농도의 사진입니다.>보시면 negative control까지 smear하게 나와서 어떻게 data를 해석해야할 지 모르겠습니다.>necrosis인지 아니면 DNA 양이 많아서 그러는 건지. (cell 수를 5*106 정도 사용했습니다.)>고수님들의 답변을 부탁드립니다. 첨부자료
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