2008-07-04
org.kosen.entty.User@38ef29f0
김도현(h3533453)
- 2
클로닝에 관련해서 질문이 있어서 이렇게 질문을 드립니다.
다름이 아니라. 아직 학부생인데 렙실에 들어왔는데 사수선생님께서 클로닝 작업준비를
지시하셨는데, 클로닝에 관해서는 미생물학, 유전학, 생화학 수업시간에 얼핏 이러이러한
원리로 한다 라는 정도에 그치고 말았고.
그 책마저 다시 보려고 하였지만 현재 장소가 장소인지라 책을 구할 방도가 없습니다.
그래서 이렇게 질문을 드립니다.
제가 현재 볼수있는 책은(실험실 내에서)
Molecular Cloning(이것을 보면된다고 하였지만) 내용이 3권이나 되고 저정도 내용중에 어느것을 취사선택하여 보아야 할지도 몰라서 이렇게 질문을 드립니다.
저희 렙에서 쓸 클로닝 방법은 DNA를 클로닝하여 넉아웃/컨트롤을 만들어 삽입하여 웨스턴으로 비교하는 방법을 쓴다고 하였는데,
너무 찾기가 막막해서 어느 부분을 보면좋을지 혹은 어느 사이트, 어떤 자료가 좋을지에 대해서 질문을 드립니다.
3권중에 어느 부분을 보는게 제가 하는 실험에 맞는걸까요?
그리고 추가로 질문을 드린다면, 클로닝에 각각 쓰는 버퍼와 왜 쓰는지와, 재료들 그리고 왜 쓰는지에 대한것도 클로닝 책에 나와있는것인가요?
+ 웨스턴 블랏 중에 왜 2차 Ab를 쓰는것인지도 궁금합니다.
- Cloning
- clon
- buffer
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 2
-
답변
김혜선님의 답변
2008-07-04- 0
>클로닝에 관련해서 질문이 있어서 이렇게 질문을 드립니다. >다름이 아니라. 아직 학부생인데 렙실에 들어왔는데 사수선생님께서 클로닝 작업준비를 >지시하셨는데, 클로닝에 관해서는 미생물학, 유전학, 생화학 수업시간에 얼핏 이러이러한 >원리로 한다 라는 정도에 그치고 말았고. >그 책마저 다시 보려고 하였지만 현재 장소가 장소인지라 책을 구할 방도가 없습니다. >그래서 이렇게 질문을 드립니다. >제가 현재 볼수있는 책은(실험실 내에서) >Molecular Cloning(이것을 보면된다고 하였지만) 내용이 3권이나 되고 저정도 내용중에 어느것을 취사선택하여 보아야 할지도 몰라서 이렇게 질문을 드립니다. >저희 렙에서 쓸 클로닝 방법은 DNA를 클로닝하여 넉아웃/컨트롤을 만들어 삽입하여 웨스턴으로 비교하는 방법을 쓴다고 하였는데, >너무 찾기가 막막해서 어느 부분을 보면좋을지 혹은 어느 사이트, 어떤 자료가 좋을지에 대해서 질문을 드립니다. >3권중에 어느 부분을 보는게 제가 하는 실험에 맞는걸까요? >그리고 추가로 질문을 드린다면, 클로닝에 각각 쓰는 버퍼와 왜 쓰는지와, 재료들 그리고 왜 쓰는지에 대한것도 클로닝 책에 나와있는것인가요? >+ 웨스턴 블랏 중에 왜 2차 Ab를 쓰는것인지도 궁금합니다. 2차 ab가 signal을 눈으로 확인 할수 있게 해줍니다.. -
답변
박재영님의 답변
2008-07-10- 0
클로닝을 설명드릴려면 너무 광범위 해서 스스로 공부를 하시는 편이 좋을듯 합니다. 전 Gene cloning & DNA analysis 란 텍스트로 공부했는데 비교적 쉽게 설명되 있어서 보기 편합니다. [Blackwell]사에서 출판하며 T.A. Brown 집필입니다. 그리고 버퍼나 실험 방법은 Western blotting protocol을 찾아보시는편이 좋을듯.. 그것도 랩마다 조금씩 다르긴 하더군요.. 위에서 말씀드린 책으로 기초를 잡으신 후 molecular cloning을 통해 버퍼조성이나 실험방법을 알아가셔야 쉽지 그냥 molecular cloning 으로 바로 들어가면 머리 복잡해지죠. 또 클로닝이라는게 말만 쉬워서리 클로닝이 잘 안될때는 이게 뭐가 문제인지 알아낼 방도가 없고 템플레이트 유전자가 애니멀에서 온건지 그람네가티브에서 온건지 그람파지티브인지에서 온건지 에 의해서도 조금씩 달라질수 있습니다.