2008-07-10
org.kosen.entty.User@1e4bc1e1
최효성(yfantas)
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maxi prep을 위해서 com.cell을 5ml LB broth에서 키우고, 다시 500ml LB broth에서 키우는 과정하는데, 5ml LB broth에서 키울때는 항생제를 넣었습니다. 그런데 500ml LB broth에 키울때는 깜빡하고 항생제를 넣지 않고 키웠습니다. 15시간을 그냥 키우다. 항생제 넣고 5시간을 더 키웠습니다. 이렇게 해도 괜찮은가요?
그리고, 마지막에 농도를 잰는데, 500ul에 2000ug/ml(purity는1.9)이 나왔습니다. 많이 나온건가요? 혹시 contamination이 되었는지 알아볼수 있는 간단한 방법은 없나요?
- LB
- maxi
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답변 2
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답변
장성재님의 답변
2008-07-10- 0
일단 플라스미드를 정제하신 것 같은데, 문제가 없을 가능성이 높습니다. 원하시는 플라스미드인지 간단히 제한효소를 이용하여 싱글 컷하셔서 사이즈를 확인하거나 보다 정확하게 목적하는 target이 삽입되어 있는지 PCR로 확인해보시는 것이 좋겠습니다. -
답변
손호선님의 답변
2008-07-23- 0
얻은 DNA의 일치 여부는 제한효소로 분석해 보면 알수있습니다. 과정은 문제가 있었지만 충분한 양의 DNA를 얻은 것으로 보입니다. >maxi prep을 위해서 com.cell을 5ml LB broth에서 키우고, 다시 500ml LB broth에서 키우는 과정하는데, 5ml LB broth에서 키울때는 항생제를 넣었습니다. 그런데 500ml LB broth에 키울때는 깜빡하고 항생제를 넣지 않고 키웠습니다. 15시간을 그냥 키우다. 항생제 넣고 5시간을 더 키웠습니다. 이렇게 해도 괜찮은가요? >그리고, 마지막에 농도를 잰는데, 500ul에 2000ug/ml(purity는1.9)이 나왔습니다. 많이 나온건가요? 혹시 contamination이 되었는지 알아볼수 있는 간단한 방법은 없나요? > >