지식나눔

Liver primary culture 방법 (collagenase perfusion method 외)

보통 Collagenase perfusion method 를 이용하시는 걸로 압니다만 다른 방법은 없을까요? 저희 lab 에 peristaltic pump 가 없어서요.. 생존률이 좀 낮게 나와도 상관없습니다만.. 좀 더 간단한 방법 알려주시면 감사하겠습니다!
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답변 1
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    한재석님의 답변

    간을 떼어내서 면도칼등으로 잘게 mincing을 하시고 그 뒤에 collagenase를 처리하는 방법이 있습니다. 처리 농도나 시간등은 실험실에서 정하셔야하고요. 하지만 너무 수득율이 안좋습니다. 제가 몇번 해봤습니다만, 영 신통치 않더라구요. 가능하시다면 직접 perfusion을 하는게 가장 좋습니다. 펌프가 없다면 용액을 높은 곳에 놓고 기압차로 perfusion할 수도 있답니다. 제가 직접해보지는 않았지만 다른 곳에서 하는 것을 본 적이 있습니다. 물론 높이에 따라 perfusion flow rate가 달라질 테니 그것도 적당히 조절하셔야 겠지요. >보통 Collagenase perfusion method 를 이용하시는 걸로 압니다만 > >다른 방법은 없을까요? 저희 lab 에 peristaltic pump 가 없어서요.. > >생존률이 좀 낮게 나와도 상관없습니다만.. > >좀 더 간단한 방법 알려주시면 감사하겠습니다!
    간을 떼어내서 면도칼등으로 잘게 mincing을 하시고 그 뒤에 collagenase를 처리하는 방법이 있습니다. 처리 농도나 시간등은 실험실에서 정하셔야하고요. 하지만 너무 수득율이 안좋습니다. 제가 몇번 해봤습니다만, 영 신통치 않더라구요. 가능하시다면 직접 perfusion을 하는게 가장 좋습니다. 펌프가 없다면 용액을 높은 곳에 놓고 기압차로 perfusion할 수도 있답니다. 제가 직접해보지는 않았지만 다른 곳에서 하는 것을 본 적이 있습니다. 물론 높이에 따라 perfusion flow rate가 달라질 테니 그것도 적당히 조절하셔야 겠지요. >보통 Collagenase perfusion method 를 이용하시는 걸로 압니다만 > >다른 방법은 없을까요? 저희 lab 에 peristaltic pump 가 없어서요.. > >생존률이 좀 낮게 나와도 상관없습니다만.. > >좀 더 간단한 방법 알려주시면 감사하겠습니다!
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