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역상 이동상 용매에 대한 질문입니다.

천연물에 대해 공부를 시작한지 얼마 안된 학생입니다.. 역상HPLC를 이용해서 물질을 분리 하려고 하는데요.. RT-TLC로 예비 실험을 했는데.. 용매 조건은 MeoH:ACN을 전기용매로 했더니.. 분리가 되더라구요.. 이조건으로 역상hplc가 가능한건지.. 논문을 찾아보니까.. 역상이용시 water+(ACN, MEOH, THF)혼합해서 쓰던지 제가 올리는 전기용매도 되는지 궁금합니다..
  • hplc
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답변 3
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    이상후님의 답변

    >천연물에 대해 공부를 시작한지 얼마 안된 학생입니다.. > >역상HPLC를 이용해서 물질을 분리 하려고 하는데요.. > >RT-TLC로 예비 실험을 했는데.. > >용매 조건은 MeoH:ACN을 전기용매로 했더니.. > >분리가 되더라구요.. > >이조건으로 역상hplc가 가능한건지.. > >논문을 찾아보니까.. 역상이용시 water+(ACN, MEOH, THF)혼합해서 >쓰던지 제가 올리는 전기용매도 되는지 궁금합니다.. RT-TLC가 reverse phase TLC를 의미하는거 같군요. 역상에 반드시 물을 사용해야 되는건 아닙니다. 분리하고자 하는 샘플의 특징에 근거해서 결정하시면 됩니다. 소수성 특징이 있는 샘플의 경우는 질문자 분처럼 MeOH : ACN 을 써봐도 크게 문제 되지는 않을 거 같습니다. 두 용매의 비율이 TCL에서의 비율과는 좀 달라질수는 있을거 같군요. 굳이 물을 사용할 경우에는 물의 비율을 10~20%정도로 낮춰서 사용할 수는 있을거 같군요. 물론 최적 조건을 설정하기 위해서는 미리 테스트를 해서 결정해야 될 거 같습니다.
    >천연물에 대해 공부를 시작한지 얼마 안된 학생입니다.. > >역상HPLC를 이용해서 물질을 분리 하려고 하는데요.. > >RT-TLC로 예비 실험을 했는데.. > >용매 조건은 MeoH:ACN을 전기용매로 했더니.. > >분리가 되더라구요.. > >이조건으로 역상hplc가 가능한건지.. > >논문을 찾아보니까.. 역상이용시 water+(ACN, MEOH, THF)혼합해서 >쓰던지 제가 올리는 전기용매도 되는지 궁금합니다.. RT-TLC가 reverse phase TLC를 의미하는거 같군요. 역상에 반드시 물을 사용해야 되는건 아닙니다. 분리하고자 하는 샘플의 특징에 근거해서 결정하시면 됩니다. 소수성 특징이 있는 샘플의 경우는 질문자 분처럼 MeOH : ACN 을 써봐도 크게 문제 되지는 않을 거 같습니다. 두 용매의 비율이 TCL에서의 비율과는 좀 달라질수는 있을거 같군요. 굳이 물을 사용할 경우에는 물의 비율을 10~20%정도로 낮춰서 사용할 수는 있을거 같군요. 물론 최적 조건을 설정하기 위해서는 미리 테스트를 해서 결정해야 될 거 같습니다.
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    심용호님의 답변

    이미 RT-TLC로 분리가 된다는것은 두 물질의 (정확히 몇개인지는 모르지만) 물성이 다르다는것입니다. 마찬가지로 HPLC에서도 두 물질의 물성이 다르다면 분리 가능합니다. 단 TLC나 HPLC의 충전물질이 같다면 같은 용매로 분리가 가능할 것입니다. 하지만 충전물질이 다를 경우 같은 용매로 안될 수도 있습니다. 다시 말해서 용매를 잘 찾으시고 컬럼조건을 잘 찾으시면 분리됩니다. 온도, 속도, 농도 등 거꾸로 TLC에서 분리가 안되더라도, HPLC에서는 분리가 되는 경우가 많습니다. 고성능 액체 크로마토그래피이니 TLC 보다 성능이 훨씬 뛰어나죠. 마지막으로, 컬럼의 경우 지용성과 수용성이 있습니다. 더러는 소량의 물이나 유기용매를 사용해도 되지만 과량을 사용하는 경우에는 분리가 안 일어나거나 컬럼에 손상을 줄수 있으므로, 조심하여야 합니다. 컬럼 사용전에 허용되는 용매등 주의사항들을 확인하시기 바랍니다.
    이미 RT-TLC로 분리가 된다는것은 두 물질의 (정확히 몇개인지는 모르지만) 물성이 다르다는것입니다. 마찬가지로 HPLC에서도 두 물질의 물성이 다르다면 분리 가능합니다. 단 TLC나 HPLC의 충전물질이 같다면 같은 용매로 분리가 가능할 것입니다. 하지만 충전물질이 다를 경우 같은 용매로 안될 수도 있습니다. 다시 말해서 용매를 잘 찾으시고 컬럼조건을 잘 찾으시면 분리됩니다. 온도, 속도, 농도 등 거꾸로 TLC에서 분리가 안되더라도, HPLC에서는 분리가 되는 경우가 많습니다. 고성능 액체 크로마토그래피이니 TLC 보다 성능이 훨씬 뛰어나죠. 마지막으로, 컬럼의 경우 지용성과 수용성이 있습니다. 더러는 소량의 물이나 유기용매를 사용해도 되지만 과량을 사용하는 경우에는 분리가 안 일어나거나 컬럼에 손상을 줄수 있으므로, 조심하여야 합니다. 컬럼 사용전에 허용되는 용매등 주의사항들을 확인하시기 바랍니다.
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    안길홍님의 답변

    >천연물에 대해 공부를 시작한지 얼마 안된 학생입니다..>>역상HPLC를 이용해서 물질을 분리 하려고 하는데요..>>RT-TLC로 예비 실험을 했는데..>>용매 조건은 MeoH:ACN을 전기용매로 했더니..>>분리가 되더라구요..>>이조건으로 역상hplc가 가능한건지..>>논문을 찾아보니까.. 역상이용시 water+(ACN, MEOH, THF)혼합해서>쓰던지 제가 올리는 전기용매도 되는지 궁금합니다.. 첨부자료
    >천연물에 대해 공부를 시작한지 얼마 안된 학생입니다..>>역상HPLC를 이용해서 물질을 분리 하려고 하는데요..>>RT-TLC로 예비 실험을 했는데..>>용매 조건은 MeoH:ACN을 전기용매로 했더니..>>분리가 되더라구요..>>이조건으로 역상hplc가 가능한건지..>>논문을 찾아보니까.. 역상이용시 water+(ACN, MEOH, THF)혼합해서>쓰던지 제가 올리는 전기용매도 되는지 궁금합니다.. 첨부자료
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