2008-08-25
org.kosen.entty.User@135f25d1
한민(jiva)
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MBP 재조합 단백질을 이용하여 실험하는 학생입니다.
논문들을 찾아보면 MBP 재조합 단백질의 수율이 18mg/ml정도로 굉장히 높게 나오는데
저는 1L의 세포를 키웠을시 수율이 1mg/ml정도로 굉장히 낮게 나옵니다.
new england biolad에서 나온 방법을 그대로 사용하는데 왜 그런지 이유를 모르겠습니다.
혹시 MBP 재조합 단백질을 이용하여 실험하시는 분들이 계시다면 수율이 어느정도 나오는지 그리고 실험방법이 어떠한지 가르쳐주시면 감사하겠습니다.
- MBP fusion protein
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
장성재님의 답변
2008-08-25- 0
MBP와 fusion시킨 모든 단백질들의 수율이 높게 나올 수는 없습니다. 단백질의 구조가 틀리듯이 원하시는 단백질의 특성에 따라서 수율은 차이가 있을 수 있습니다. 즉, 목적하는 유전자가 문제없이 클로닝되었고, IPTG에 의해 induction이 잘되었다고 해도 단백질의 구조에 따른 solubility의 차이에 의해 수율이 변할 수 있습니다. NEB의 매뉴얼을 보시면 troubleshooting and tips 부분을 참고하셔서 차근히 본인이 원하는 단백질의 수율이 저조한 이유를 확인해 보시길 바랍니다. >MBP 재조합 단백질을 이용하여 실험하는 학생입니다. >논문들을 찾아보면 MBP 재조합 단백질의 수율이 18mg/ml정도로 굉장히 높게 나오는데 >저는 1L의 세포를 키웠을시 수율이 1mg/ml정도로 굉장히 낮게 나옵니다. >new england biolad에서 나온 방법을 그대로 사용하는데 왜 그런지 이유를 모르겠습니다. >혹시 MBP 재조합 단백질을 이용하여 실험하시는 분들이 계시다면 수율이 어느정도 나오는지 그리고 실험방법이 어떠한지 가르쳐주시면 감사하겠습니다. >