지식나눔

antibody Fab fragment 정량하는 방법이 있나요?

microarray 쪽을 공부하고있는 학생입니다. antibody-antigen interaction 할 때 antibody Fab fragment를 사용했을 때 sensitibity가 좋다는 논문들이 많은데 papain으로 자른 antibody Fab fragment의 농도는 어떻게 정량을 하는건가요? 답변 부탁드립니다.
  • antibody fragmentation
  • Fab
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답변 1
  • 답변

    장성재님의 답변

    Fab fragment를 정제 후에 정량할 때에는 일반적인 단백질 정량법으로 정량하시면 됩니다 (비색법, UV법 등등). 정제 전의 반응물이 섞인 상태에서는 BSA를 농도별로 시료와 같이 로딩 후 SDS-PAGE 후에 coomasie blue로 염색한 후 Fab fragment의 크기에 있는 밴드의 농도를 BSA와 비교하여 정량하시면 됩니다.
    Fab fragment를 정제 후에 정량할 때에는 일반적인 단백질 정량법으로 정량하시면 됩니다 (비색법, UV법 등등). 정제 전의 반응물이 섞인 상태에서는 BSA를 농도별로 시료와 같이 로딩 후 SDS-PAGE 후에 coomasie blue로 염색한 후 Fab fragment의 크기에 있는 밴드의 농도를 BSA와 비교하여 정량하시면 됩니다.
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