KOSEN 한인과학기술자네트워크

닫기

더 많은 혜택을 위해
로그인 하세요.

지식나눔

지식나눔

Closteridium acetobutylicum...배양에 대해 , 협기성미생물..배양

2008-09-07 org.kosen.entty.User@2cf7d1d2 박주용(p5j8y)
  • 2
제가 이번에 Clostridium acetobutylicum을 분양받았습니다. anaerobicbacteria라서 .... 일단 kctc에서 받았고... 거기 나와있는 RCM(reinforced clostridial medium) 으로 broth와 plate 각각 만들었구요. 일단 vial에 rcm을 넣고 질소퍼징을 해서 멸균에서 주사기로 꾹 넣어서 37도에 인큐베이터에 넣어 보니까 18시간정도 되니까 뿌옇게 흐려졌습니다. 아마도 컸다고생각이 되는데요?... 그래서 다시 plate에 넣고 glove box가없어서 클린벤치에서 ^^; 후다닥 계대배양을 해서 anaerobic jar 나 chamber가 없어서 hypoxia에 넣고 질소퍼징을 해서 37도 CO2(5%)인큐베이터에 넣었습니다. 그런데... 거기서는 자라지 않았습니다. 1. 왜?? 그럴까요?? 그래서 우선 anaerobic chamber 와 gaspack을 사려고 하는데요... gaspack은 종류가 다양한데... 2. anarobic 과 CO2 gaspack과의 차이점은 어떤걸까요?? 그리고 BD 거는 gaspack에서 incubation container 와 incubation container Rack 과의 3. 차이점은 무엇인가요?? 아니면 혹시 추천해주실 만한 것은 있으시면 꼭!! 부담없이 많은 내용 부탁 드립니다. 거기다가 빨리 제가 원하는 C. acetobutylicum인지 확인하기 위한 pcr도 해야하는데... 걱정이 앞섭니다. 그래도 꼭 해서 앞으로 나아가고 싶습니다. 아직 어립니다. 그래서 모르는 것이 너무 많습니다. 좋은 답변 부탁드립니다.
  • anaerobic
  • clostridium
  • culture
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변하기
답변 2
  • 답변

    김범수님의 답변

    2008-09-08
    • 2
    >제가 이번에 Clostridium acetobutylicum을 분양받았습니다. > >anaerobicbacteria라서 .... > >일단 kctc에서 받았고... 거기 나와있는 RCM(reinforced clostridial medium) 으로 > >broth와 plate 각각 만들었구요. > >일단 vial에 rcm을 넣고 질소퍼징을 해서 멸균에서 > >주사기로 꾹 넣어서 37도에 인큐베이터에 넣어 보니까 18시간정도 되니까 > >뿌옇게 흐려졌습니다. >아마도 컸다고생각이 되는데요?... > >그래서 다시 plate에 넣고 >glove box가없어서 클린벤치에서 ^^; >후다닥 계대배양을 해서 > >anaerobic jar 나 chamber가 없어서 > >hypoxia에 넣고 질소퍼징을 해서 37도 CO2(5%)인큐베이터에 넣었습니다. >그런데... >거기서는 자라지 않았습니다. > >1. 왜?? 그럴까요?? > >그래서 우선 anaerobic chamber 와 gaspack을 사려고 하는데요... > >gaspack은 종류가 다양한데... > >2. anarobic 과 CO2 gaspack과의 차이점은 어떤걸까요?? > >그리고 BD 거는 gaspack에서 incubation container 와 incubation container Rack 과의 >3. 차이점은 무엇인가요?? > >아니면 혹시 추천해주실 만한 것은 있으시면 꼭!! > >부담없이 많은 내용 부탁 드립니다. > >거기다가 빨리 제가 원하는 C. acetobutylicum인지 확인하기 위한 > >pcr도 해야하는데... >걱정이 앞섭니다. 그래도 꼭 해서 앞으로 나아가고 싶습니다. > >아직 어립니다. 그래서 모르는 것이 너무 많습니다. > > >좋은 답변 부탁드립니다. > 저는 미생물 전공이 아니라 잘은 모르지만, Clostridium acetobutylicum은 대표적인 혐기성균으로 산소에 대한 내성을 갖고 있는 경우가 많아서 소량의 산소에 노출되어도 쉽게 사멸하는 경우가 더러 있습니다. 따라서 저산소조건보다는 질소, 이산화탄소, 수소 등의 조합가스를 넣어주는 것이 어떨까 생각되고 이산화탄소는 10% 이상으로 조절하는 것이 어떨까 생각됩니다. 감사합니다.
    답변수정
    >제가 이번에 Clostridium acetobutylicum을 분양받았습니다. > >anaerobicbacteria라서 .... > >일단 kctc에서 받았고... 거기 나와있는 RCM(reinforced clostridial medium) 으로 > >broth와 plate 각각 만들었구요. > >일단 vial에 rcm을 넣고 질소퍼징을 해서 멸균에서 > >주사기로 꾹 넣어서 37도에 인큐베이터에 넣어 보니까 18시간정도 되니까 > >뿌옇게 흐려졌습니다. >아마도 컸다고생각이 되는데요?... > >그래서 다시 plate에 넣고 >glove box가없어서 클린벤치에서 ^^; >후다닥 계대배양을 해서 > >anaerobic jar 나 chamber가 없어서 > >hypoxia에 넣고 질소퍼징을 해서 37도 CO2(5%)인큐베이터에 넣었습니다. >그런데... >거기서는 자라지 않았습니다. > >1. 왜?? 그럴까요?? > >그래서 우선 anaerobic chamber 와 gaspack을 사려고 하는데요... > >gaspack은 종류가 다양한데... > >2. anarobic 과 CO2 gaspack과의 차이점은 어떤걸까요?? > >그리고 BD 거는 gaspack에서 incubation container 와 incubation container Rack 과의 >3. 차이점은 무엇인가요?? > >아니면 혹시 추천해주실 만한 것은 있으시면 꼭!! > >부담없이 많은 내용 부탁 드립니다. > >거기다가 빨리 제가 원하는 C. acetobutylicum인지 확인하기 위한 > >pcr도 해야하는데... >걱정이 앞섭니다. 그래도 꼭 해서 앞으로 나아가고 싶습니다. > >아직 어립니다. 그래서 모르는 것이 너무 많습니다. > > >좋은 답변 부탁드립니다. > 저는 미생물 전공이 아니라 잘은 모르지만, Clostridium acetobutylicum은 대표적인 혐기성균으로 산소에 대한 내성을 갖고 있는 경우가 많아서 소량의 산소에 노출되어도 쉽게 사멸하는 경우가 더러 있습니다. 따라서 저산소조건보다는 질소, 이산화탄소, 수소 등의 조합가스를 넣어주는 것이 어떨까 생각되고 이산화탄소는 10% 이상으로 조절하는 것이 어떨까 생각됩니다. 감사합니다.
    등록된 댓글이 없습니다.
  • 답변

    김중재님의 답변

    2008-09-08
    • 0
    1. 글쎄요. 배양시 colony 가 생기지 않는 이유는 너무 다양해서... 일단 배양을 원하시는 Clostridium acetobutylicum 에 대한 정보를 찾아 보세요. KCTC 이외의 기관 또는 논문에서는 어떤 배지와 어떤 배양 조건을 사용했는지.. 배양이 까다로운 균주인지.. 절대 혐기성균인지 편성 혐기성균인지.. 많은 clostridium 균이 glove box 없이도 잘 자라거든요. 2. anaerobic 과 CO2 gaspak 과의 차이점 anaerobic gaspak 은 Hydrogen 과 CO2 를 생성하여 혐기적인 상태를 만들어 주고, CO2 gaspak 은 CO2-enriched aerobic 환경을 만들어 줍니다. - anaerobic gaspak: http://www.bd.com/ds/productCenter/271040.asp - CO2 gaspak: http://www.bd.com/ds/productCenter/270308.asp 3. incubation container 는 말 그대로 jar 또는 사작 case 를 말하는 것이고, rack 은 petri dish 나 test tube 를 세우기 편하게 틀을 만들어 놓은 것을 말합니다. - BD GasPak EZ rack: http://www.puls-norge.no/handicare/pages/Product____126643.aspx?epslanguage=NO - GasPak™ 100 Rack: http://websites.labx.com/rankin/detail.cfm?p=1&autonumber=7321 추천? - anaerobic 상태를 확인하기 위한 indicator strip 의 사용을 추천합니다. (http://www.bd.com/ds/productCenter/271051.asp) - 혹시 한국에서도 Mitsubishi Gas Chemical 의 anaerobic system 을 구하실 수 있으면 가격적인 면에서 BD 보다 조금 낫지 않을까 합니다. (http://www.remel.com/Clinical/LabSupplies/AnaeroPack.aspx) 개인적인 경험상 BD 의 anaerobic jar 는 뚜껑이 잘 파손되더라구요. 그래도 indicator strip 만은 BD 제품을 추천합니다.
    답변수정
    1. 글쎄요. 배양시 colony 가 생기지 않는 이유는 너무 다양해서... 일단 배양을 원하시는 Clostridium acetobutylicum 에 대한 정보를 찾아 보세요. KCTC 이외의 기관 또는 논문에서는 어떤 배지와 어떤 배양 조건을 사용했는지.. 배양이 까다로운 균주인지.. 절대 혐기성균인지 편성 혐기성균인지.. 많은 clostridium 균이 glove box 없이도 잘 자라거든요. 2. anaerobic 과 CO2 gaspak 과의 차이점 anaerobic gaspak 은 Hydrogen 과 CO2 를 생성하여 혐기적인 상태를 만들어 주고, CO2 gaspak 은 CO2-enriched aerobic 환경을 만들어 줍니다. - anaerobic gaspak: http://www.bd.com/ds/productCenter/271040.asp - CO2 gaspak: http://www.bd.com/ds/productCenter/270308.asp 3. incubation container 는 말 그대로 jar 또는 사작 case 를 말하는 것이고, rack 은 petri dish 나 test tube 를 세우기 편하게 틀을 만들어 놓은 것을 말합니다. - BD GasPak EZ rack: http://www.puls-norge.no/handicare/pages/Product____126643.aspx?epslanguage=NO - GasPak™ 100 Rack: http://websites.labx.com/rankin/detail.cfm?p=1&autonumber=7321 추천? - anaerobic 상태를 확인하기 위한 indicator strip 의 사용을 추천합니다. (http://www.bd.com/ds/productCenter/271051.asp) - 혹시 한국에서도 Mitsubishi Gas Chemical 의 anaerobic system 을 구하실 수 있으면 가격적인 면에서 BD 보다 조금 낫지 않을까 합니다. (http://www.remel.com/Clinical/LabSupplies/AnaeroPack.aspx) 개인적인 경험상 BD 의 anaerobic jar 는 뚜껑이 잘 파손되더라구요. 그래도 indicator strip 만은 BD 제품을 추천합니다.
    등록된 댓글이 없습니다.
목록
목록