2008-09-16
org.kosen.entty.User@4956ecbd
김현욱(ilmas)
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안녕하세요
반갑습니다
제가 있는 연구실은 주로 in vivo에서 실험을 진행하는데요...
이번에 culture를 하게 되었구요, 그중에서도 Hela cell을 키워야 할듯 합니다.
Cell은 다른방 선배가 주시기로 했는데.
제가 한번도 Cell을 키워본적이 없어서 전반적인 culture의 방법이나, 유지, 보관법 등에 관해
아는 내용이 없습니다.
특히 Hela cell과 관련된 내용을 찾아보려 했는데 어디서 어떻게 찾아봐야 할지도 모르겠더라구요. 새로운 분야에서 실험을 한다는게 쉬운일은 아닌듯 합니다...
종합해서 제가 여쭤보고 싶은것은
1. Cell culture와 관련된 전반적인 내용이나 protocol이 있는 책이나, 논문 있으면 추천 부탁드려 봅니다.
2. Hela cell을 culture할때 배지라던지, 몇일에 한번 배지를 갈아주는지, 온도나 습도는 어떻게 되는 지 등등 전반적인 내용을 담고있는 paper나 웹사이트 있으면 부탁드려 봅니다.
3. 최종적으로는 Hela cell에 transfection을 해서 미토콘드리아의 형태변화를 EM으로 관찰할 예정인데요, transfection에 관한 protocol, 특히 Hela cell에 적용 가능한 방법으로 부탁드려 봅니다.
두서없는 많은 내용의 질문을 드려 죄송합니다.
culture 선배님들의 작은 조언 부탁드립니다 ^^
건승하세요!
-김현욱-
- hela cell
- culture
- transfection
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
김은민님의 답변
2008-09-16- 0
> 종합해서 제가 여쭤보고 싶은것은 1. Cell culture와 관련된 전반적인 내용이나 protocol이 있는 책이나, 논문 있으면 추천 부탁드려 봅니다. 2. Hela cell을 culture할때 배지라던지, 몇일에 한번 배지를 갈아주는지, 온도나 습도는 어떻게 되는 지 등등 전반적인 내용을 담고있는 paper나 웹사이트 있으면 부탁드려 봅니다. 1.2를 모두 충족시켜줄수 있는 web site를 추천해드립니다. http://www.atcc.org/ ATCC가 culture cell관련 모든 information이 이곳에 있다고해도 과언이 아닙니다. 일단 보편적인 HeLa cell에 대한 내용은 http://www.atcc.org/ATCCAdvancedCatalogSearch/ProductDetails/tabid/452/Default.aspx?ATCCNum=CCL-2&Template=cellBiology 이 주소로 들어가시면 해결하실수 있습니다. Hela cell도 종류가 여러가지가 있기때문에 다른 이름의 HeLa cell은 제가 추천해드린 ATCC 홈페이지에 들어가셔서 search란에 HeLa를 치시면 된답니다. 책도 하나 추천드릴게요. Culture of animal cells (a manual of basic technic) 저자: R. lan freshney입니다. 많은 도움이 되시리라 믿습니다. > 3. 최종적으로는 Hela cell에 transfection을 해서 미토콘드리아의 형태변화를 EM으로 관찰할 예정인데요, transfection에 관한 protocol, 특히 Hela cell에 적용 가능한 방법으로 부탁드려 봅니다. HeLa cell 뿐 아니라, 많은 cell line의 transfection efficiency 등 모든 컨디션은 실험실에서 직접 테스트하시고, 최상의 조건을 도출하셔야한답니다. DNA는 얼마나 쓸것인지.. 어떤 transfection reagent를 쓸것인가?(lipofectamine, PEI, effectin 기타등등.. 회사별로 권장하는 transfection reagent가 있으니 검토해 보세요~) 등등 실험실에 셋팅되어있는 것을 이용하는 것이 가장 좋을 듯합니다. 위에서 권해드린 책에 cell 관련 protocol 의 대부분이 있습니다. 꼭 찾아보세요. 건승을 빕니다.