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지식나눔

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혐기성 미생물배양(Clostridium acetobutylicum)액체배지에서 배양부분에 대하여...

2008-09-18 org.kosen.entty.User@7471736d 박주용(p5j8y)
  • 4
제가 혐기성 미생물배양(Clostridium acetobutylicum)을 배양하려고 하는데... 액체배지에서 배양하는 부분에서 지금은 50ml짜리 vial에서 하고 있거든요... 병은 스크류식 특수 세럼병에다 하고... 뚜껑은 거기에 맞는 Butyl Stopper 로 하고 있습니다. 그런데.. 문제는 50ml이 가장 큰 거라서요... 좀더 큰 것에서 키워야할 실험인데... 성장 속도를 체크해야하는데... 좀 큰거에 키워서 시간 때 마다 흡광도 측정해서 보려구요... 그래서 조그만하면... 자꾸 시간이 지남에 따라 전체 용량이 바뀌니까... 좀 큰것에다 해서 웬만하면.. 차이가 나이 않도록 하려고 하는데... 추천해주실만한 병과 뚜껑... 그리고 방법이 있으신분께.. 조언 부탁드립니다. 제가 이제 막 들어온 신입생이다 보니까.. 모르는것이 많습니다.
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답변 4
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    장성재님의 답변

    2008-09-18
    • 0
    편법이지만, 1mL 정도의 vial을 이용해서 성장 속도 측정시 필요한 회수(sampling) 수량 만큼 준비하시고, 동량의 seed를 접종 후 하나씩 회수하시는 것이 더 쉽지 않을까요? 한 곳에서 배양하면서 회수하려면 배양 용기 내부의 조건이 계속 바뀔 것 같은데요. >제가 혐기성 미생물배양(Clostridium acetobutylicum)을 배양하려고 하는데... > >액체배지에서 배양하는 부분에서 지금은 50ml짜리 vial에서 하고 있거든요... > >병은 스크류식 특수 세럼병에다 하고... > >뚜껑은 거기에 맞는 Butyl Stopper 로 하고 있습니다. > >그런데.. 문제는 50ml이 가장 큰 거라서요... > >좀더 큰 것에서 키워야할 실험인데... > >성장 속도를 체크해야하는데... > >좀 큰거에 키워서 시간 때 마다 흡광도 측정해서 보려구요... > >그래서 조그만하면... 자꾸 시간이 지남에 따라 전체 용량이 바뀌니까... > >좀 큰것에다 해서 웬만하면.. 차이가 나이 않도록 하려고 하는데... > >추천해주실만한 병과 뚜껑... 그리고 방법이 있으신분께.. 조언 부탁드립니다. > >제가 이제 막 들어온 신입생이다 보니까.. 모르는것이 많습니다. > >
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    편법이지만, 1mL 정도의 vial을 이용해서 성장 속도 측정시 필요한 회수(sampling) 수량 만큼 준비하시고, 동량의 seed를 접종 후 하나씩 회수하시는 것이 더 쉽지 않을까요? 한 곳에서 배양하면서 회수하려면 배양 용기 내부의 조건이 계속 바뀔 것 같은데요. >제가 혐기성 미생물배양(Clostridium acetobutylicum)을 배양하려고 하는데... > >액체배지에서 배양하는 부분에서 지금은 50ml짜리 vial에서 하고 있거든요... > >병은 스크류식 특수 세럼병에다 하고... > >뚜껑은 거기에 맞는 Butyl Stopper 로 하고 있습니다. > >그런데.. 문제는 50ml이 가장 큰 거라서요... > >좀더 큰 것에서 키워야할 실험인데... > >성장 속도를 체크해야하는데... > >좀 큰거에 키워서 시간 때 마다 흡광도 측정해서 보려구요... > >그래서 조그만하면... 자꾸 시간이 지남에 따라 전체 용량이 바뀌니까... > >좀 큰것에다 해서 웬만하면.. 차이가 나이 않도록 하려고 하는데... > >추천해주실만한 병과 뚜껑... 그리고 방법이 있으신분께.. 조언 부탁드립니다. > >제가 이제 막 들어온 신입생이다 보니까.. 모르는것이 많습니다. > >
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  • 답변

    김중재님의 답변

    2008-09-18
    • 0

    첨부파일

    이전에 혐기성 배양에 대한 질문을 하셨던 것으로 기억하는데, 배양에는 성공하신 모양이군요. 축하드립니다. 질문하신 내용에 대해 몇 가지 안을 생각해 보았습니다. 1. sampling 하실 때 1 ml 씩 하지 말고 필요한 만큼만 한다. 저의 경우 0.5 ml 씩 sampling 하기도 합니다. 2. butyl rubber stopper 의 사용이 가능한 더 큰 serum bottle 을 찾아 본다. 기억에 50 ml 이상의 serun bottle 도 본 것 같습니다. 초자 판매하는 업자분을 볶아 보세요. 3. 아래 첨부한 그림의 cap 이 사용되는 schott bottle 은 5 L 까지도 사용해 본 적 있습니다. 문제는 cap 인데, 중간의 구멍에 맞는 silicon stopper 를 사서 사용하면 됩니다. 혹시 시판 제품을 구하기 어려우시면, 업자분에게 autoclave 가능한 두번째 그림과 같은 재질로 만들어 달라고 하시면 만들어 줄 겁니다.
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    이전에 혐기성 배양에 대한 질문을 하셨던 것으로 기억하는데, 배양에는 성공하신 모양이군요. 축하드립니다. 질문하신 내용에 대해 몇 가지 안을 생각해 보았습니다. 1. sampling 하실 때 1 ml 씩 하지 말고 필요한 만큼만 한다. 저의 경우 0.5 ml 씩 sampling 하기도 합니다. 2. butyl rubber stopper 의 사용이 가능한 더 큰 serum bottle 을 찾아 본다. 기억에 50 ml 이상의 serun bottle 도 본 것 같습니다. 초자 판매하는 업자분을 볶아 보세요. 3. 아래 첨부한 그림의 cap 이 사용되는 schott bottle 은 5 L 까지도 사용해 본 적 있습니다. 문제는 cap 인데, 중간의 구멍에 맞는 silicon stopper 를 사서 사용하면 됩니다. 혹시 시판 제품을 구하기 어려우시면, 업자분에게 autoclave 가능한 두번째 그림과 같은 재질로 만들어 달라고 하시면 만들어 줄 겁니다.
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    박주용님의 답변

    2008-09-18
    • 0
    관심과 좋은 답변 감사드립니다. 그럼... 지금은 주사기 바늘로 찔러서 접종이나 샘플을 채취할 수 있는데... 이런 마개로 뚜껑을 막으면 어떻게 할 수 있을까요??
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    관심과 좋은 답변 감사드립니다. 그럼... 지금은 주사기 바늘로 찔러서 접종이나 샘플을 채취할 수 있는데... 이런 마개로 뚜껑을 막으면 어떻게 할 수 있을까요??
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    김중재님의 답변

    2008-09-19
    • 0
    Buytl rubber stopper 는 몇 번 찌르면 구멍이 나서 공기가 새지 않던가요? 저는 그렇던데.. 그래서 바꾼 것이 실리콘으로 만들어진 cap 이었습니다. 바늘을 조심해서 찔러야 하는 단점(?)이 있지만, 몇 번을 찔러도 공기가 새지 않는 장점(?)도 있습니다. 너무 얇은 바늘이 아니라면 샘플링 가능합니다. (너무 굵은 바늘을 쓰니까 실리콘 조각이 바늘 속으로 들어가 바늘이 막히기도 하더군요)
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    Buytl rubber stopper 는 몇 번 찌르면 구멍이 나서 공기가 새지 않던가요? 저는 그렇던데.. 그래서 바꾼 것이 실리콘으로 만들어진 cap 이었습니다. 바늘을 조심해서 찔러야 하는 단점(?)이 있지만, 몇 번을 찔러도 공기가 새지 않는 장점(?)도 있습니다. 너무 얇은 바늘이 아니라면 샘플링 가능합니다. (너무 굵은 바늘을 쓰니까 실리콘 조각이 바늘 속으로 들어가 바늘이 막히기도 하더군요)
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