2008-09-26
org.kosen.entty.User@7e340136
이승욱(prsman21)
- 2
>BLOOD 성분중 RBC 만을 응집 제거시키는 방법이 있나요
>
>원심분리 전에 어떤 물질을 첨가하면 RBC 부분이 응집 되고
>
>BUFFY COAT 층을 포함한 혈장을 쉽게 얻을 수 있는 방법이 있는지요
>
>미리 감사드립니다
>
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혈액량이 충분하고 원하시는 것이 혈장과 PBMC(peripheral blood mononuclear cells)라면 Ficoll을 사용하시는 것이 가장 좋은 방법일 것 같습니다. 좋은 실험 되세요..
위 답변 주신 선생님께 감사드리며
Ficoll 관련 파일을 올려주신 선생님께도 감사드립니다
그런데
10 CC 의 BLOOD 에도 사용이 가능 할까요
가능하다면 어떻게 사용을 하는지요
인체에는 무해 한지요
잘몰라 여러 질문 올립니다
미리 감사드립니다
- BLOOD
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
송창화님의 답변
2008-09-27- 0
혈액에서 buffy coat를 분리하기 위해서는 일반적으로 혈액과 Ficoll을 1:1비율로 사용합니다. 그러니까 10ml의 혈액을 분리하려면 10ml의 Ficoll을 사용하면 되는데 Ficoll을 먼저 튜브에 채우고 그 위에 혈액을 층이 흔들리지 않도록 서서히 쌓은 후 원심분리(1500 rpm, 30 min, RT)를 하시면 층이 나누어져 있는 것을 볼 수 있습니다. 혈장이 맨 윗층 그다음에 buffy coat층이 아주 얇게 하얗게 보이고, 그 다음은 Ficoll, 그리고 바닥에 가라앉은 층이 RBC입니다. 원하시는 buffy coat나 혈장을 피펫으로 꺼내면 되고 림프구를 분리하시려면 얻은 buffy coat층을 PBS로 수차례 세척해내시면 됩니다. 물론 이때도 원심 분리해야되겠지요. Ficoll이 인체에 유해한지는 모르지만 림프구에 자극을 줄 수는 있습니다. 따라서 PBS로 최소 2회 이상 세척하여 ficoll을 제거해야 합니다. > >>BLOOD 성분중 RBC 만을 응집 제거시키는 방법이 있나요 >> >>원심분리 전에 어떤 물질을 첨가하면 RBC 부분이 응집 되고 >> >>BUFFY COAT 층을 포함한 혈장을 쉽게 얻을 수 있는 방법이 있는지요 >> >>미리 감사드립니다 >> >> > >혈액량이 충분하고 원하시는 것이 혈장과 PBMC(peripheral blood mononuclear cells)라면 Ficoll을 사용하시는 것이 가장 좋은 방법일 것 같습니다. 좋은 실험 되세요.. > > > > >위 답변 주신 선생님께 감사드리며 > >Ficoll 관련 파일을 올려주신 선생님께도 감사드립니다 > > > > >그런데 > >10 CC 의 BLOOD 에도 사용이 가능 할까요 >가능하다면 어떻게 사용을 하는지요 >인체에는 무해 한지요 > > >잘몰라 여러 질문 올립니다 >미리 감사드립니다 > -
답변
윤철희님의 답변
2008-09-29- 0
저희 연구실에서는.. 직접 채혈한 혈액의 경우 PBS로 1:1로 희석을 한 후 Ficoll을 사용하고.. 혈액원에서 가져오는 Buffy coat의 경우에는 2~3 (PBS) : 1 (혈액; 농축이 되어 있으므로) 으로 희석을 한 후 Ficoll을 사용하여 분리합니다. 좋은 실험되세요.. >>BLOOD 성분중 RBC 만을 응집 제거시키는 방법이 있나요 >> >>원심분리 전에 어떤 물질을 첨가하면 RBC 부분이 응집 되고 >> >>BUFFY COAT 층을 포함한 혈장을 쉽게 얻을 수 있는 방법이 있는지요 >> >>미리 감사드립니다 >> >> > >혈액량이 충분하고 원하시는 것이 혈장과 PBMC(peripheral blood mononuclear cells)라면 Ficoll을 사용하시는 것이 가장 좋은 방법일 것 같습니다. 좋은 실험 되세요.. > > > > >위 답변 주신 선생님께 감사드리며 > >Ficoll 관련 파일을 올려주신 선생님께도 감사드립니다 > > > > >그런데 > >10 CC 의 BLOOD 에도 사용이 가능 할까요 >가능하다면 어떻게 사용을 하는지요 >인체에는 무해 한지요 > > >잘몰라 여러 질문 올립니다 >미리 감사드립니다 >