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Ficoll은 액체로 된 것을 구입하시면 됩니다. 1:1 비율은 액체 대 액체 비율을 말하는 것입니다. 고체로 되어 있는 경우는 용법대로 녹여서 사용해야겠지만, 액체로 구매하시어 사용하시는 것이 더 쉬울 것같네요. Amersham이나 Sigma에서 찾아보시면 됩니다만 Amersham이 더 싼 것으로 기억하고 있어요. > > >아래 답변 주신 선생님께 감사드립니다 > >그런데 > >어느 선생님께서 올려주신 Ficoll 에 대한 파일을 읽어보니 > >피콜이 파우더 폼이던데 BLOOD 10 CC 와 1 : 1 이란 말씀에 > >피콜을 어떻게, 어떤농도로 용해 시켜 1:1 을 만드는지요 > >모르는게 많아 자주 여쭙니다 > >미리 감사드리고요 > > > > > > > >혈액에서 buffy coat를 분리하기 위해서는 일반적으로 혈액과 Ficoll을 1:1비율로 사용합니다. > >그러니까 10ml의 혈액을 분리하려면 10ml의 Ficoll을 사용하면 되는데 Ficoll을 먼저 튜브에 채우고 그 위에 혈액을 층이 흔들리지 않도록 서서히 쌓은 후 원심분리(1500 rpm, 30 min, RT)를 하시면 층이 나누어져 있는 것을 볼 수 있습니다. > >혈장이 맨 윗층 그다음에 buffy coat층이 아주 얇게 하얗게 보이고, >그 다음은 Ficoll, 그리고 바닥에 가라앉은 층이 RBC입니다. >원하시는 buffy coat나 혈장을 피펫으로 꺼내면 되고 림프구를 분리하시려면 얻은 buffy coat층을 PBS로 수차례 세척해내시면 됩니다. 물론 이때도 원심 분리해야되겠지요. > >Ficoll이 인체에 유해한지는 모르지만 림프구에 자극을 줄 수는 있습니다. 따라서 PBS로 최소 2회 이상 세척하여 ficoll을 제거해야 합니다. > > >> >>>BLOOD 성분중 RBC 만을 응집 제거시키는 방법이 있나요 >>> >>>원심분리 전에 어떤 물질을 첨가하면 RBC 부분이 응집 되고 >>> >>>BUFFY COAT 층을 포함한 혈장을 쉽게 얻을 수 있는 방법이 있는지요 >>> >>>미리 감사드립니다 >>> >>> >> >>혈액량이 충분하고 원하시는 것이 혈장과 PBMC(peripheral blood mononuclear cells)라면 Ficoll을 사용하시는 것이 가장 좋은 방법일 것 같습니다. 좋은 실험 되세요.. >> >> >> >> >>위 답변 주신 선생님께 감사드리며 >> >>Ficoll 관련 파일을 올려주신 선생님께도 감사드립니다 >> >> >> >> >>그런데 >> >>10 CC 의 BLOOD 에도 사용이 가능 할까요 >>가능하다면 어떻게 사용을 하는지요 >>인체에는 무해 한지요 >> >> >>잘몰라 여러 질문 올립니다 >>미리 감사드립니다 >>>

우선 인체에 무해하는냐는 질문을 하셨는데.. Ficoll은 혈액을 채취한 후 사용하는 용액으로 인체에 직접 사용 하면 안됩니다.. 질문이 혈액 채취 후 사용을 하여도 혈액세포가 안전하느냐라는 질문이셨다면 'YES' 입니다. 그리고 전에 답변을 하신 Issch님의 프로토콜을 참고하시면 됩니다.. 단지 한가지 centrifuge 할때 반드시 break를 off 시키고 사용하셔야 합니다.. 그리고 참고고 저희 연구실에서는.. 직접 채혈한 혈액의 경우 PBS로 1:1로 희석을 한 후 Ficoll을 사용하고.. 혈액원에서 가져오는 Buffy coat의 경우에는 2~3 (PBS) : 1 (혈액; 농축이 되어 있으므로) 으로 희석을 한 후 Ficoll을 사용하여 분리합니다. 좋은 실험되세요.. 질문이 있으시면 쪽지 보내주시기 바랍니다.. 좋은 실험 되세요.. >아래 답변 주신 선생님께 감사드립니다 > >그런데 > >어느 선생님께서 올려주신 Ficoll 에 대한 파일을 읽어보니 > >피콜이 파우더 폼이던데 BLOOD 10 CC 와 1 : 1 이란 말씀에 > >피콜을 어떻게, 어떤농도로 용해 시켜 1:1 을 만드는지요 > >모르는게 많아 자주 여쭙니다 > >미리 감사드리고요 > > > > > > > >혈액에서 buffy coat를 분리하기 위해서는 일반적으로 혈액과 Ficoll을 1:1비율로 사용합니다. > >그러니까 10ml의 혈액을 분리하려면 10ml의 Ficoll을 사용하면 되는데 Ficoll을 먼저 튜브에 채우고 그 위에 혈액을 층이 흔들리지 않도록 서서히 쌓은 후 원심분리(1500 rpm, 30 min, RT)를 하시면 층이 나누어져 있는 것을 볼 수 있습니다. > >혈장이 맨 윗층 그다음에 buffy coat층이 아주 얇게 하얗게 보이고, >그 다음은 Ficoll, 그리고 바닥에 가라앉은 층이 RBC입니다. >원하시는 buffy coat나 혈장을 피펫으로 꺼내면 되고 림프구를 분리하시려면 얻은 buffy coat층을 PBS로 수차례 세척해내시면 됩니다. 물론 이때도 원심 분리해야되겠지요. > >Ficoll이 인체에 유해한지는 모르지만 림프구에 자극을 줄 수는 있습니다. 따라서 PBS로 최소 2회 이상 세척하여 ficoll을 제거해야 합니다. > > >> >>>BLOOD 성분중 RBC 만을 응집 제거시키는 방법이 있나요 >>> >>>원심분리 전에 어떤 물질을 첨가하면 RBC 부분이 응집 되고 >>> >>>BUFFY COAT 층을 포함한 혈장을 쉽게 얻을 수 있는 방법이 있는지요 >>> >>>미리 감사드립니다 >>> >>> >> >>혈액량이 충분하고 원하시는 것이 혈장과 PBMC(peripheral blood mononuclear cells)라면 Ficoll을 사용하시는 것이 가장 좋은 방법일 것 같습니다. 좋은 실험 되세요.. >> >> >> >> >>위 답변 주신 선생님께 감사드리며 >> >>Ficoll 관련 파일을 올려주신 선생님께도 감사드립니다 >> >> >> >> >>그런데 >> >>10 CC 의 BLOOD 에도 사용이 가능 할까요 >>가능하다면 어떻게 사용을 하는지요 >>인체에는 무해 한지요 >> >> >>잘몰라 여러 질문 올립니다 >>미리 감사드립니다 >>>