2008-10-20
org.kosen.entty.User@6ad0651d
고유진(youjin6286)
- 4
gold nanoparticle을 이용한 실험을 진행하고 있습니다.
아무도 안해본거라... 논문만 보고 실험을 진행중에 있는데 너무 모르는게 많네요..ㅠ.ㅠ
저는 gold nanoparticle에 thiol modified oligonucleotide를 붙혀서 안정성 평가를 하고싶습니다.
gold nanoparticle은 sigma에서 판매하는 colloidal상태를 구입했습니다.
여기에 20mer정도의 oligonucleotide를 부착하는데...
문제는 colloidal nanoparticle을 희석하는게 문제입니다.
얘를 UV-Vis를 이용해서 흡광도를 측정하여 농도를 계산한 결과 10uM이 들어있다고 나왔습니다.
그런데 제가 필요한 농도는 10nM입니다. 1000배를 희석해서 써야하는데.. 어떤 solution으로 희석해야할지 ....
PBS나 D.W로 희석하였을경우 aggregation되어 밑으로 nanoparticle이 가라앉았습니다.
colloidal gold nanoparticle을 희석할 경우 어떻게 해야할지 궁금합니다. ㅠ.ㅠ
- nanoparticle
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 4
-
답변
김수희님의 답변
2008-10-20- 0
>gold nanoparticle을 이용한 실험을 진행하고 있습니다. >아무도 안해본거라... 논문만 보고 실험을 진행중에 있는데 너무 모르는게 많네요..ㅠ.ㅠ > >저는 gold nanoparticle에 thiol modified oligonucleotide를 붙혀서 안정성 평가를 하고싶습니다. >gold nanoparticle은 sigma에서 판매하는 colloidal상태를 구입했습니다. >여기에 20mer정도의 oligonucleotide를 부착하는데... >문제는 colloidal nanoparticle을 희석하는게 문제입니다. >얘를 UV-Vis를 이용해서 흡광도를 측정하여 농도를 계산한 결과 10uM이 들어있다고 나왔습니다. >그런데 제가 필요한 농도는 10nM입니다. 1000배를 희석해서 써야하는데.. 어떤 solution으로 희석해야할지 .... >PBS나 D.W로 희석하였을경우 aggregation되어 밑으로 nanoparticle이 가라앉았습니다. >colloidal gold nanoparticle을 희석할 경우 어떻게 해야할지 궁금합니다. ㅠ.ㅠ 저랑 비슷한 것을 하시는 것 같습니다. 답변이 될지 모르겠지만 금 나노 파티클 자체는 매우 불안정해서 버퍼 용액을 넣는들 침전만 생기게 됩니다. 하지만 금 나노 파티클에 바이오물질 즉, 올리고뉴클레오타이드를 넣은 다음 버퍼를 넣으면 안정성이 증가하여 침전이 되지 않을 겁니다. 제가 읽는 논문에서는 나노파티클과 바이오물질을 붙인 후, 오버나이트 반응을 시키고 그 다음에 버퍼 용액을 넣고 오버나이트 반응 후, 실험을 진행하게 되어있는데- 어떤 논문인지 읽어보지 않아 잘 모르겠지만 아마 나노파티클을 안정화 시키는게 우선이 아니라 바이오물질을 넣은 다음 실험을 진행 하셔야 할 거 같습니다. 도움이 되셨는지 모르겠습니다. -
답변
안길홍님의 답변
2008-10-20- 0
단,Au의 희석후 혼합물질이 실험에 방해가 되지 않는 조건입니다. 현재 가지고 있는 물질에 분산제(또는 계면 활성제라고도 함: Triton X-100같은 물질)를 전체 중량에 중량비 2%정도 넣어서 실험실에 있는 Impeller로 고속 교반하여 주십시요. 30분 정도 교반하면 거품이 생기는데 속도를 저속으로 하여 소포제를 적당량(약 2~5%)을 넣어서 교반한후 30분에서 1시간 정도 두면 기포가 거의 없어질 것입니다. 이때 희석하고자 하는 용액-주로 D.W-을 넣어 희석하시기를. -
답변
최용두님의 답변
2008-10-22- 0
>gold nanoparticle을 이용한 실험을 진행하고 있습니다. >아무도 안해본거라... 논문만 보고 실험을 진행중에 있는데 너무 모르는게 많네요..ㅠ.ㅠ > >저는 gold nanoparticle에 thiol modified oligonucleotide를 붙혀서 안정성 평가를 하고싶습니다. >gold nanoparticle은 sigma에서 판매하는 colloidal상태를 구입했습니다. >여기에 20mer정도의 oligonucleotide를 부착하는데... >문제는 colloidal nanoparticle을 희석하는게 문제입니다. >얘를 UV-Vis를 이용해서 흡광도를 측정하여 농도를 계산한 결과 10uM이 들어있다고 나왔습니다. >그런데 제가 필요한 농도는 10nM입니다. 1000배를 희석해서 써야하는데.. 어떤 solution으로 희석해야할지 .... >PBS나 D.W로 희석하였을경우 aggregation되어 밑으로 nanoparticle이 가라앉았습니다. >colloidal gold nanoparticle을 희석할 경우 어떻게 해야할지 궁금합니다. ㅠ.ㅠ 골드 나노입자 표면에 negatively charged oligonucleotide를 conjugation 충분히 시킨 후에는 희석을 하여도 aggregation이 발생하지 않습니다.conjugation이 안된 골드 콜로이드 용액은 보통은 sodium citrate용액에 분산되어 안정화 되어 있는데, 증류수로 희석하면 용액상의 citrate농도가 낮아지고 골드 콜로이드 표면에 흡착되어 있던 citrate가 떨어져 나가면서 입자간 aggregation발생합니다. 용액상의 Ionic strength를 높여도 aggregation이 일어납니다. 희석할때 citrate 용액으로 희석하시는게 좋을것으로 보입니다. citrate 용액의 pH 및 농도가 얼마인지는 문헌이나 시그마에서 제공하는 정보가 있는지 보시고, citrate 용액도 농도가 너무 높으면 aggregation이 일어날 수도 있지 않나 싶습니다만.. -
답변
이상후님의 답변
2010-02-01- 0
>gold nanoparticle을 이용한 실험을 진행하고 있습니다. >아무도 안해본거라... 논문만 보고 실험을 진행중에 있는데 너무 모르는게 많네요..ㅠ.ㅠ>>저는 gold nanoparticle에 thiol modified oligonucleotide를 붙혀서 안정성 평가를 하고싶습니다.>gold nanoparticle은 sigma에서 판매하는 colloidal상태를 구입했습니다.>여기에 20mer정도의 oligonucleotide를 부착하는데...>문제는 colloidal nanoparticle을 희석하는게 문제입니다.>얘를 UV-Vis를 이용해서 흡광도를 측정하여 농도를 계산한 결과 10uM이 들어있다고 나왔습니다.>그런데 제가 필요한 농도는 10nM입니다. 1000배를 희석해서 써야하는데.. 어떤 solution으로 희석해야할지 ....>PBS나 D.W로 희석하였을경우 aggregation되어 밑으로 nanoparticle이 가라앉았습니다.>colloidal gold nanoparticle을 희석할 경우 어떻게 해야할지 궁금합니다. ㅠ.ㅠ PBS나 D.W.와 에탄올을 5:5 나 6:4 정도로 만든 용액으로 희석해 보세요.