2008-10-24
org.kosen.entty.User@2eabef5f
주정인(sebspd)
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바닥에 붙어 자라는 CELL을 QIAGEN kit를 사용하여서 total RNA를 분리 하려고 합니다. 그런데.. dish에 붙어있는 cell 에 반응을 알아보기위한 물질을 treat후에 어떻게 dish에서 떼어내면 될까요??
고수님들 답변부탁드립니다..
- rt pcr
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
장성재님의 답변
2008-10-24- 0
어떤 키트를 사용하시는지 모르지만, 키트에 첨부된 설명서를 참고하시길 바랍니다. 부착성 세포의 경우에는 cell을 따로 떼어내지 않고 배지만을 제거한 후 lysis buffer를 직접 처리할 수도 있습니다. Qiagen의 RNeasy kit의 경우 trypsin으로 처리할 것을 권장하고 있네요 (PBS로 washing 후 trypsin-EDTA처리하여 원심분리 후 세포 회수). 막을 이용하여 total RNA를 분리하므로 배지 성분이 이를 저해할 수도 있다는 설명.... 단 배양 용기의 직경이 3.5 cm이상인 경우 직접 lysis buffer를 사용할 수도 있다고 합니다. >바닥에 붙어 자라는 CELL을 QIAGEN kit를 사용해서 total RNA를 분리 하려고 합니다. 그런데.. dish에 붙어있는 cell 에 반응을 알아보기위한 물질을 treat후에 어떻게 dish에서 떼어내면 될까요?? >고수님들 답변부탁드립니다.. -
답변
박수제님의 답변
2008-10-24- 0
>바닥에 붙어 자라는 CELL을 QIAGEN kit를 사용하여서 total RNA를 분리 하려고 합니다. 그런데.. dish에 붙어있는 cell 에 반응을 알아보기위한 물질을 treat후에 어떻게 dish에서 떼어내면 될까요?? >고수님들 답변부탁드립니다.. 차라리 Trizol 같은 reagent를 가지고 cell에 직접 뿌려서 harvest하는 것이 좋을 것 같은데요...