2008-11-04
org.kosen.entty.User@2fca8fa
김장훈(netizen2)
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세포배양배지에 잔류하는 성분중 특정 단백질의 잔류량을 분석하려고 합니다.
(ex, trypsin, FBS, growth factor등)
표준품이 있을때, HPLC나 LC 등을 이용해서 정량적 분석이 가능한가요?
만약 된다면, 분석하고자하는 단백질 마다 분석 방법이 틀려지나요?
분석가능한 곳이 있으면 연락처 부탁드립니다.
그럼 좋은하루 되세요~
- 잔류량
- HPLC LC
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
장성재님의 답변
2008-11-04- 2
growth factor와 같이 소량으로 존재하는 경우는 HPLC나 LC보다 ELISA를 이용하여 정량이 가능할 것 같습니다. 대부분의 growth factor의 경우 ELISA kit가 시판되어 있습니다. 그러나, FBS (fetal bovine serum)의 경우 성분이 복잡하여 모든 FBS 성분의 잔류량을 측정한다는 것이 가능할지 모르겠군요. 세포 배양을 통한 단백질 의약품 생산시의 잔류 단백질을 측정하는 것이 목적이시라면 애초에 대량 배양시의 배지를 무혈정 혹은 무단백질 전용 배지를 사용하실 것을 권합니다. 다양한 제품들이 개발되어 시판되고 있습니다. >세포배양배지에 잔류하는 성분중 특정 단백질의 잔류량을 분석하려고 합니다. >(ex, trypsin, FBS, growth factor등) > >표준품이 있을때, HPLC나 LC 등을 이용해서 정량적 분석이 가능한가요? > >만약 된다면, 분석하고자하는 단백질 마다 분석 방법이 틀려지나요? > >분석가능한 곳이 있으면 연락처 부탁드립니다. > >그럼 좋은하루 되세요~ -
답변
오은정님의 답변
2008-11-05- 0
>세포배양배지에 잔류하는 성분중 특정 단백질의 잔류량을 분석하려고 합니다. >(ex, trypsin, FBS, growth factor등) > >표준품이 있을때, HPLC나 LC 등을 이용해서 정량적 분석이 가능한가요? > >만약 된다면, 분석하고자하는 단백질 마다 분석 방법이 틀려지나요? > >분석가능한 곳이 있으면 연락처 부탁드립니다. > >그럼 좋은하루 되세요~ 관련업체 근무자입니다. Trypsin은 enzyme activity로 unit을 측정하시는편이 좋을것 같습니다. 또한 FBS는 complex기 때문에 FBS의 함량 자체를 검출하기는 어렵습니다. Growth factor는 ELISA를 사용하시면 되는데요. 오차는 조금 있지만 picogram까지 detecting이 된답니다.(실험결과로는 신뢰성은 nanogram 이상을 추천합니다.) 배지 자체에 있는 특정성분을 HPLC/LC등으로 분석한다는것은 실제 거의 불가능 합니다. 대게 protein의 경우 분석방식에 따라 차이는 있지만, RP를 사용하였 을때 RT가 겹치는 경우가 매우 많습니다. 게다가, 배지같이 여러 물질이 함께 혼합되어 있는경우, peak는 거의 분석 불가수준으로 겹쳐버립니다. 참고하시고 좋은 하루되세요