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지식나눔

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PEG에서 10000 8000 6000의 차이점에 대해서

2008-11-12 org.kosen.entty.User@373426ae 최훈성(hschoi77)
  • 3
virus polyetyylene precipitation에서 10000, 8000, 6000의 차이점에 대해서 묻고자 합니다. 그리고 EDTA가 들어가는데 왜 들어가는지도 궁금합니다. 최적농도도 가르쳐 주시면 감사하겠습니다.
  • polyethylene
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답변 3
  • 답변

    이상후님의 답변

    2008-11-12
    • 0

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    >virus polyetyylene precipitation에서 > >10000, 8000, 6000의 차이점에 대해서 묻고자 합니다. > >그리고 EDTA가 들어가는데 왜 들어가는지도 궁금합니다. >최적농도도 가르쳐 주시면 감사하겠습니다. PEG 10000, 8000, 6000, 3000 등은 polyethylene glycol의 평균 분자량을 의미합니다. EDTA 첨가는 metal ions나 다른 ions류와 chelating 을 이루워서 바이러스를 inactivation시키기 위해서 사용하고, 최적농도는 정해져 있지 않고 조건마다 약간씩 다를 수 있습니다. 보통 1~5mM정도 첨가합니다. 참고로 관련 논문을 첨부하오니 참고바랍니다.
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    >virus polyetyylene precipitation에서 > >10000, 8000, 6000의 차이점에 대해서 묻고자 합니다. > >그리고 EDTA가 들어가는데 왜 들어가는지도 궁금합니다. >최적농도도 가르쳐 주시면 감사하겠습니다. PEG 10000, 8000, 6000, 3000 등은 polyethylene glycol의 평균 분자량을 의미합니다. EDTA 첨가는 metal ions나 다른 ions류와 chelating 을 이루워서 바이러스를 inactivation시키기 위해서 사용하고, 최적농도는 정해져 있지 않고 조건마다 약간씩 다를 수 있습니다. 보통 1~5mM정도 첨가합니다. 참고로 관련 논문을 첨부하오니 참고바랍니다.
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  • 답변

    이배훈님의 답변

    2008-11-12
    • 0
    >virus polyetyylene precipitation에서 > >10000, 8000, 6000의 차이점에 대해서 묻고자 합니다. > >그리고 EDTA가 들어가는데 왜 들어가는지도 궁금합니다. >최적농도도 가르쳐 주시면 감사하겠습니다. ]VIRUS CONCENTRATION BY PEG PRECIPITATION Reagents: Polyethylene glycol Sigma, MW10000 NaCl tissue culture grade (?) EDTA tissue culture grade precipitate (NaCl) H2O deionized pyrogen free 0.1N NaOH pyrogen free Solutions: Add 100g PEG and 6g NaCl to 250ml H2O in 500ml bottle. Mix. Autoclave at 15lb for 20 minutes. Allow to cool. Adjust pH with NaOH to pH 7.2 under sterile conditions. Protocol: 1. Infect cells and allow to incubate for as long as necessary to approach maximum virus production for the strain and cell type combination. 2. Centrifuge culture at 1000rpm for 7 minutes. 3. Resuspend cell pellet in fresh media. Incubate for an additional 48hrs. 4. Centrifuge culture at 14000rpm for 15 minutes to remove cells. 5. Collect supernatant and add 1 volume of PEG solution to 4 volumes of virus containing supernatant. 6. Refrigerate overnight (stable up to 2 weeks @ 4 ？C). 7. Centrifuge at 2300rpm for 45 minutes. 8. Remove supernatant. 9. Resuspend viruspellet in 1/10 to 1/100 of original volume. 10. Aliquot in small aliquots and store at -70 ？C until use. Procedure gives 1 to 2 log increase in final infectious virus titer.
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    >virus polyetyylene precipitation에서 > >10000, 8000, 6000의 차이점에 대해서 묻고자 합니다. > >그리고 EDTA가 들어가는데 왜 들어가는지도 궁금합니다. >최적농도도 가르쳐 주시면 감사하겠습니다. ]VIRUS CONCENTRATION BY PEG PRECIPITATION Reagents: Polyethylene glycol Sigma, MW10000 NaCl tissue culture grade (?) EDTA tissue culture grade precipitate (NaCl) H2O deionized pyrogen free 0.1N NaOH pyrogen free Solutions: Add 100g PEG and 6g NaCl to 250ml H2O in 500ml bottle. Mix. Autoclave at 15lb for 20 minutes. Allow to cool. Adjust pH with NaOH to pH 7.2 under sterile conditions. Protocol: 1. Infect cells and allow to incubate for as long as necessary to approach maximum virus production for the strain and cell type combination. 2. Centrifuge culture at 1000rpm for 7 minutes. 3. Resuspend cell pellet in fresh media. Incubate for an additional 48hrs. 4. Centrifuge culture at 14000rpm for 15 minutes to remove cells. 5. Collect supernatant and add 1 volume of PEG solution to 4 volumes of virus containing supernatant. 6. Refrigerate overnight (stable up to 2 weeks @ 4 ？C). 7. Centrifuge at 2300rpm for 45 minutes. 8. Remove supernatant. 9. Resuspend viruspellet in 1/10 to 1/100 of original volume. 10. Aliquot in small aliquots and store at -70 ？C until use. Procedure gives 1 to 2 log increase in final infectious virus titer.
    등록된 댓글이 없습니다.
  • 답변

    안길홍님의 답변

    2010-01-30
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    첨부파일

    >virus polyetyylene precipitation에서 > >10000, 8000, 6000의 차이점에 대해서 묻고자 합니다. > >그리고 EDTA가 들어가는데 왜 들어가는지도 궁금합니다. >최적농도도 가르쳐 주시면 감사하겠습니다. 첨부자료
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    >virus polyetyylene precipitation에서 > >10000, 8000, 6000의 차이점에 대해서 묻고자 합니다. > >그리고 EDTA가 들어가는데 왜 들어가는지도 궁금합니다. >최적농도도 가르쳐 주시면 감사하겠습니다. 첨부자료
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