2008-11-26
org.kosen.entty.User@40e73ffa
이장한(hanymir)
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cell에 nano particle을 처리해서 SEM과 TEM 둘 다 찍어보려고 하는데요
cell fixation을 어떻게 해야할지 궁금해서요
SEM같은경우에는 wash후 2% glutaraldehyde로 fixation하여
EtOH로 serial dehydrate하면 된다고 논문에 나와있는데
TEM sample도 마찬가지로 SEM과 같은 protocol로 fixation해도 될지 몰라서요
TEM, SEM 둘다 찍어본적이없는 초보입니다. 설명주탁드려요.
- tem
- sem
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답변 1
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답변
박성철님의 답변
2008-11-28- 0
>cell에 nano particle을 처리해서 SEM과 TEM 둘 다 찍어보려고 하는데요 > >cell fixation을 어떻게 해야할지 궁금해서요 > >SEM같은경우에는 wash후 2% glutaraldehyde로 fixation하여 > >EtOH로 serial dehydrate하면 된다고 논문에 나와있는데 > >TEM sample도 마찬가지로 SEM과 같은 protocol로 fixation해도 될지 몰라서요 > >TEM, SEM 둘다 찍어본적이없는 초보입니다. 설명주탁드려요. SEM과 TEM의 sample preparation은 다릅니다. SEM은 위의 방법대로 되지만 TEM은 아주 간단합니다. cell과 nano particle과 incubation한뒤 1) carbon coated cupper grid위에 올리고 negative stain (UAC, AM or PTA)을 하고 dry한뒤 TEM으로 관찰 또는 2)먼저 반응하고 stain을 한뒤 (1-3 min) grid에 올려서 1-3 min 정도 둔뒤 filterpaper로 grid의 옆면에 살짝대고 stain 을 제거하고 air dry한뒤 TEM 관찰하시면 됩니다. 좋은 결과 있으시길.... 참, cell이 잘부착이 안될수도 있읍니다. carbon 바닥이 hydrophobic이라, 표면을 hydrophilic으로 만들려면 plasma cleaner가 필요한데 구비가 다안되있어 그냥 cell 농도를 높이는 수 밖에 없네요....