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지식나눔

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Sephadex LH-20 제조방법

2009-02-02 org.kosen.entty.User@6821309b 박재성(chrisrub)
  • 3
Sephadex LH-20 컬럼을 사용하여 추출물을 분획하고자 하고 있습니다. 그러나 Sephadex LH-20컬럼 제조에 있어서 모르는 점이 너무 많은지라.. 1)Sephadex LH-20 resin을 어떻게 팽윤시키며(MeOH로 팽윤시킬 계획임) 2)컬럼 보호를 위해 버퍼를 사용한다고 하는데 어떤 버퍼를 사용해야 하며 어떻게 사용하는지.. 3)혹 Sephadex LH-20 resin이 충진된 컬럼이 있는지 알고 싶습니다. 이러한 내용들은 논문에도 안 나와있는지라 실험을 진행시키는데 어려움이 많습니다. 답변 부탁드리겠습니다^^
  • Sephadex LH-20
  • 분획
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답변 3
  • 답변

    이상후님의 답변

    2009-02-03
    • 2
    >Sephadex LH-20 컬럼을 사용하여 추출물을 분획하고자 하고 있습니다. >그러나 Sephadex LH-20컬럼 제조에 있어서 모르는 점이 너무 많은지라.. >1)Sephadex LH-20 resin을 어떻게 팽윤시키며(MeOH로 팽윤시킬 계획임) >2)컬럼 보호를 위해 버퍼를 사용한다고 하는데 어떤 버퍼를 사용해야 하며 > 어떻게 사용하는지.. >3)혹 Sephadex LH-20 resin이 충진된 컬럼이 있는지 >알고 싶습니다. > 이러한 내용들은 논문에도 안 나와있는지라 실험을 진행시키는데 어려움이 많습니다. > 답변 부탁드리겠습니다^^ 참고적으로 기존 판매되는 resin의 column에의 충진 절차를 알려드립니다. 1. Methanol에 resin을 mixing한 후에 swelling 시키고 suspension 상태를 만듬. swelling 과정동안 shaking --> 침전시까지 방치 --> 위부분에 떠 있는 fines(미세 불순물 또는 분말류)를 제거시킴. 2. 적당한 길이(예로, 450x20 mm)의 오픈 컬럼을 준비하고 사용할 용매로 완전히 흘려주면서 air bubbles을 제거시킴. 이후 컬럼의 outlet 부분을 막은후에 컬럼의 윗 부분에 inlet부분에 부워줌. 이때 필요할 경우, 리저버(reservoir)를 연결시킨후에 사용해도 무방함. 3. 1에서 제조한 슬러리를 천천히 부워줌. 4. 만약 컬럼이 슬러리로 완전히 채워지지 않을 경우, 사용 용매로 완전히 채워줌. 5. peristaltic pump에 연결하거나 펌프가 없을 경우, 중력으로 충진될때까지 기다림. 펌프에 연결했을 경우 Outlet 밸브를 열어준 상태로 충진함. 6. 이때 컬럼에 충진되는 resin들이 resin이 변형되지 않을 정도의 최대의 압력으로 충진되어야 함. 7. 모든 resin이 충진되면 리저버를 제거함. 8. adaptor를 삽입함. 9. 최종적으로 충진된 gel들이 ladder가 있는지의 확인함. ladder가 있을 경우 충진이 올바르게 안된 상태임.
    답변수정
    >Sephadex LH-20 컬럼을 사용하여 추출물을 분획하고자 하고 있습니다. >그러나 Sephadex LH-20컬럼 제조에 있어서 모르는 점이 너무 많은지라.. >1)Sephadex LH-20 resin을 어떻게 팽윤시키며(MeOH로 팽윤시킬 계획임) >2)컬럼 보호를 위해 버퍼를 사용한다고 하는데 어떤 버퍼를 사용해야 하며 > 어떻게 사용하는지.. >3)혹 Sephadex LH-20 resin이 충진된 컬럼이 있는지 >알고 싶습니다. > 이러한 내용들은 논문에도 안 나와있는지라 실험을 진행시키는데 어려움이 많습니다. > 답변 부탁드리겠습니다^^ 참고적으로 기존 판매되는 resin의 column에의 충진 절차를 알려드립니다. 1. Methanol에 resin을 mixing한 후에 swelling 시키고 suspension 상태를 만듬. swelling 과정동안 shaking --> 침전시까지 방치 --> 위부분에 떠 있는 fines(미세 불순물 또는 분말류)를 제거시킴. 2. 적당한 길이(예로, 450x20 mm)의 오픈 컬럼을 준비하고 사용할 용매로 완전히 흘려주면서 air bubbles을 제거시킴. 이후 컬럼의 outlet 부분을 막은후에 컬럼의 윗 부분에 inlet부분에 부워줌. 이때 필요할 경우, 리저버(reservoir)를 연결시킨후에 사용해도 무방함. 3. 1에서 제조한 슬러리를 천천히 부워줌. 4. 만약 컬럼이 슬러리로 완전히 채워지지 않을 경우, 사용 용매로 완전히 채워줌. 5. peristaltic pump에 연결하거나 펌프가 없을 경우, 중력으로 충진될때까지 기다림. 펌프에 연결했을 경우 Outlet 밸브를 열어준 상태로 충진함. 6. 이때 컬럼에 충진되는 resin들이 resin이 변형되지 않을 정도의 최대의 압력으로 충진되어야 함. 7. 모든 resin이 충진되면 리저버를 제거함. 8. adaptor를 삽입함. 9. 최종적으로 충진된 gel들이 ladder가 있는지의 확인함. ladder가 있을 경우 충진이 올바르게 안된 상태임.
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  • 답변

    신재욱님의 답변

    2009-02-02
    • 0
    Sephadex LH-20은 gel filtration resin입니다. 주로 유기용매(물)을 사용하여 swelling합니다. 용매에 따라 swelling되는 부피도 다릅니다. Sephadex LH-20은 Autoclave도 가능할 정도로 안정성이 뒤어납니다. 자세한 내용은 아래의 주소를 참고하세요. http://www.gelifesciences.co.jp/tech_support/manual/pdf/chrgfc/56119097.pdf
    답변수정
    Sephadex LH-20은 gel filtration resin입니다. 주로 유기용매(물)을 사용하여 swelling합니다. 용매에 따라 swelling되는 부피도 다릅니다. Sephadex LH-20은 Autoclave도 가능할 정도로 안정성이 뒤어납니다. 자세한 내용은 아래의 주소를 참고하세요. http://www.gelifesciences.co.jp/tech_support/manual/pdf/chrgfc/56119097.pdf
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    안길홍님의 답변

    2010-01-25
    • 0

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    >Sephadex LH-20 컬럼을 사용하여 추출물을 분획하고자 하고 있습니다. >그러나 Sephadex LH-20컬럼 제조에 있어서 모르는 점이 너무 많은지라.. >1)Sephadex LH-20 resin을 어떻게 팽윤시키며(MeOH로 팽윤시킬 계획임) >2)컬럼 보호를 위해 버퍼를 사용한다고 하는데 어떤 버퍼를 사용해야 하며 > 어떻게 사용하는지.. >3)혹 Sephadex LH-20 resin이 충진된 컬럼이 있는지 >알고 싶습니다. > 이러한 내용들은 논문에도 안 나와있는지라 실험을 진행시키는데 어려움이 많습니다. > 답변 부탁드리겠습니다^^ 참고자료
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    >Sephadex LH-20 컬럼을 사용하여 추출물을 분획하고자 하고 있습니다. >그러나 Sephadex LH-20컬럼 제조에 있어서 모르는 점이 너무 많은지라.. >1)Sephadex LH-20 resin을 어떻게 팽윤시키며(MeOH로 팽윤시킬 계획임) >2)컬럼 보호를 위해 버퍼를 사용한다고 하는데 어떤 버퍼를 사용해야 하며 > 어떻게 사용하는지.. >3)혹 Sephadex LH-20 resin이 충진된 컬럼이 있는지 >알고 싶습니다. > 이러한 내용들은 논문에도 안 나와있는지라 실험을 진행시키는데 어려움이 많습니다. > 답변 부탁드리겠습니다^^ 참고자료
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