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지식나눔

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CAPS Transfer Buffer

2009-02-04 org.kosen.entty.User@60d3a85 최훈성(hschoi77)
  • 1
5 kDa protein을 detect하기 위해 western을 진행하려고 합니다. transfer시 caps transfer buffer를 사용해야 한다는데 이유와 주의점에 대해 말씀해주시면 고맙겠습니다. membrane은 PVDF를 사용하면 되는지도 궁금합니다.
  • CAPS
  • Transfer Buffer
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답변 1
  • 답변

    신재욱님의 답변

    2009-02-04
    • 0
    Membrane의 경우에는 PVDF membrane을 사용하시면 됩니다. Rapid immunodetection, edman sequencing, glycoprotein detection, SDS존재시 binding등에서 nitrocellulose membrane보다 우수합니다. 5kDa protein의 경우 % gel을 잘 택하시고 5kDa protein의 >pI 9 이상이시면 caps buffer(pH10.5)를 사용하시면 좋습니다. 그외에는 일반적인 transfer buffer를 사용하셔도 문제는 특별히 없는 것으로 알고 있습니다. 다만, small MW이기 때문에 transfer시 field strength나 transfer time이 매우 중요합니다. Transfer buffer도 중요하지만 오히려 field strength나 transfer time이 더 중요할수도 있습니다. 좋은 결과 얻으시길 바라겠습니다.
    답변수정
    Membrane의 경우에는 PVDF membrane을 사용하시면 됩니다. Rapid immunodetection, edman sequencing, glycoprotein detection, SDS존재시 binding등에서 nitrocellulose membrane보다 우수합니다. 5kDa protein의 경우 % gel을 잘 택하시고 5kDa protein의 >pI 9 이상이시면 caps buffer(pH10.5)를 사용하시면 좋습니다. 그외에는 일반적인 transfer buffer를 사용하셔도 문제는 특별히 없는 것으로 알고 있습니다. 다만, small MW이기 때문에 transfer시 field strength나 transfer time이 매우 중요합니다. Transfer buffer도 중요하지만 오히려 field strength나 transfer time이 더 중요할수도 있습니다. 좋은 결과 얻으시길 바라겠습니다.
    최훈성(hschoi77) 2009-02-25

    늦었지만 정말 감사합니다.

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