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SOD 유사활성 실험방법에 대해 질문합니다

2009-02-16 org.kosen.entty.User@4a7979ca 한은경(hphd423)
  • 2
SOD 유사활성 실험 때문에 질문드립니다. 논문을 검색하여 나와있는 방법은 다음과 같습니다. 일전농도의 시료 0.2ml에 pH 8.5로 보정한 tris-HCL buffer (50mM tris+ 10mM EDTA, pH8.5) 2.6ml과 7.2mM pyrogallol 0.2ml 를 첨가하여 25도에서 10분간 반응시킨후 1N HCl 0.1ml을 가하여 반응을 정지시켰다. 반응액중 산화된 pyrogallol의 양은 420nm 에서 흡광도를 측정하였다. SOD유사활성은 시료의 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도의 차이를 백분율로 나타내었다. 이렇게 실험방법을 검색하였는데 궁금한점은 pH 8.5로 보정한 tris-HCL buffer (50mM tris+ 10mM EDTA, pH8.5)제조방법입니다. 원문의 제목은 Marklund G, Marklund S Involvement of superoxide anion radical in the oxidation of pyrogallol and a convenient assay for superoxide dismutase. Eur. J. Biochem. 47:468-474. 1974 이 논문입니다. buffer 제조 방법에 대해 알려주세요
  • SOD 유사활성
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답변 2
  • 답변

    최영욱님의 답변

    2009-02-19
    • 0
    1 M Tris pH8.5 stock을 만드신후 dilution하여 제조하십시오. EDTA는 0.5M stock를 농도에 맞게 첨가 하시면 됩니다. SOD assay kit도 시중에 나와있으니 참고해 보십시오. 일본의 Dojindo라는 회사에서 SOD kit을 저렴하게 판매하고 있습니다. >SOD 유사활성 실험 때문에 질문드립니다. >논문을 검색하여 나와있는 방법은 다음과 같습니다. > >일전농도의 시료 0.2ml에 pH 8.5로 보정한 >tris-HCL buffer (50mM tris+ 10mM EDTA, pH8.5) 2.6ml과 >7.2mM pyrogallol 0.2ml 를 첨가하여 >25도에서 10분간 반응시킨후 >1N HCl 0.1ml을 가하여 반응을 정지시켰다. >반응액중 산화된 pyrogallol의 양은 420nm 에서 흡광도를 측정하였다. >SOD유사활성은 시료의 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도의 차이를 백분율로 나타내었다. > >이렇게 실험방법을 검색하였는데 >궁금한점은 pH 8.5로 보정한 >tris-HCL buffer (50mM tris+ 10mM EDTA, pH8.5)제조방법입니다. > >원문의 제목은 >Marklund G, Marklund S >Involvement of superoxide anion radical in the oxidation of pyrogallol and a convenient assay for superoxide dismutase. Eur. J. Biochem. 47:468-474. 1974 >이 논문입니다. > >buffer 제조 방법에 대해 알려주세요 >
    답변수정
    1 M Tris pH8.5 stock을 만드신후 dilution하여 제조하십시오. EDTA는 0.5M stock를 농도에 맞게 첨가 하시면 됩니다. SOD assay kit도 시중에 나와있으니 참고해 보십시오. 일본의 Dojindo라는 회사에서 SOD kit을 저렴하게 판매하고 있습니다. >SOD 유사활성 실험 때문에 질문드립니다. >논문을 검색하여 나와있는 방법은 다음과 같습니다. > >일전농도의 시료 0.2ml에 pH 8.5로 보정한 >tris-HCL buffer (50mM tris+ 10mM EDTA, pH8.5) 2.6ml과 >7.2mM pyrogallol 0.2ml 를 첨가하여 >25도에서 10분간 반응시킨후 >1N HCl 0.1ml을 가하여 반응을 정지시켰다. >반응액중 산화된 pyrogallol의 양은 420nm 에서 흡광도를 측정하였다. >SOD유사활성은 시료의 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도의 차이를 백분율로 나타내었다. > >이렇게 실험방법을 검색하였는데 >궁금한점은 pH 8.5로 보정한 >tris-HCL buffer (50mM tris+ 10mM EDTA, pH8.5)제조방법입니다. > >원문의 제목은 >Marklund G, Marklund S >Involvement of superoxide anion radical in the oxidation of pyrogallol and a convenient assay for superoxide dismutase. Eur. J. Biochem. 47:468-474. 1974 >이 논문입니다. > >buffer 제조 방법에 대해 알려주세요 >
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  • 답변

    김주성님의 답변

    2009-03-26
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    먼저 50mM tris와 10mM EDTA를 넣은후 HCl로 pH8.5로 보정하시면 됩니다. 가령 100미리를 만드신다면 tris 0.6055그램과 EDTA 0.3722그램을 넣고 물 98미리를 넣어서 녹이신후 HCl로 pH8.5로 보정하시고 메스실린더로 옮기신후 100미리를 맞추시면 됩니다 >SOD 유사활성 실험 때문에 질문드립니다. >논문을 검색하여 나와있는 방법은 다음과 같습니다. > >일전농도의 시료 0.2ml에 pH 8.5로 보정한 >tris-HCL buffer (50mM tris+ 10mM EDTA, pH8.5) 2.6ml과 >7.2mM pyrogallol 0.2ml 를 첨가하여 >25도에서 10분간 반응시킨후 >1N HCl 0.1ml을 가하여 반응을 정지시켰다. >반응액중 산화된 pyrogallol의 양은 420nm 에서 흡광도를 측정하였다. >SOD유사활성은 시료의 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도의 차이를 백분율로 나타내었다. > >이렇게 실험방법을 검색하였는데 >궁금한점은 pH 8.5로 보정한 >tris-HCL buffer (50mM tris+ 10mM EDTA, pH8.5)제조방법입니다. > >원문의 제목은 >Marklund G, Marklund S >Involvement of superoxide anion radical in the oxidation of pyrogallol and a convenient assay for superoxide dismutase. Eur. J. Biochem. 47:468-474. 1974 >이 논문입니다. > >buffer 제조 방법에 대해 알려주세요 >
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    먼저 50mM tris와 10mM EDTA를 넣은후 HCl로 pH8.5로 보정하시면 됩니다. 가령 100미리를 만드신다면 tris 0.6055그램과 EDTA 0.3722그램을 넣고 물 98미리를 넣어서 녹이신후 HCl로 pH8.5로 보정하시고 메스실린더로 옮기신후 100미리를 맞추시면 됩니다 >SOD 유사활성 실험 때문에 질문드립니다. >논문을 검색하여 나와있는 방법은 다음과 같습니다. > >일전농도의 시료 0.2ml에 pH 8.5로 보정한 >tris-HCL buffer (50mM tris+ 10mM EDTA, pH8.5) 2.6ml과 >7.2mM pyrogallol 0.2ml 를 첨가하여 >25도에서 10분간 반응시킨후 >1N HCl 0.1ml을 가하여 반응을 정지시켰다. >반응액중 산화된 pyrogallol의 양은 420nm 에서 흡광도를 측정하였다. >SOD유사활성은 시료의 첨가구와 무첨가구 사이의 흡광도의 차이를 백분율로 나타내었다. > >이렇게 실험방법을 검색하였는데 >궁금한점은 pH 8.5로 보정한 >tris-HCL buffer (50mM tris+ 10mM EDTA, pH8.5)제조방법입니다. > >원문의 제목은 >Marklund G, Marklund S >Involvement of superoxide anion radical in the oxidation of pyrogallol and a convenient assay for superoxide dismutase. Eur. J. Biochem. 47:468-474. 1974 >이 논문입니다. > >buffer 제조 방법에 대해 알려주세요 >
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