2009-02-23
org.kosen.entty.User@ae70df5
황혜정(dianastar)
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activity 측정시 SAMS peptide 사용해서 activity를 측정하려고 하는데
attachment cell말고 suspension cell을 가지고 실험 할때는 어떻게 해야 할지요
protocol은 attachment cell을 가지고 하는 방법 이더라고요
혹시 suspension cell 가지고 실험 하셨던 분이 있다면 도와주세요
그리고 AMPK activity는 IP와 비슷한 것인지요?
- activity
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답변 1
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답변
장성재님의 답변
2009-02-23- 0
adherent cell과 suspension cell의 차이라고 한다면 washing 단계에서 세포를 원심분리하여 배지를 제거 후 PBS로 washing해준다는 차이만 있을 것 같군요. 다시 원신분리 후 PBS를 제거하고 lysis buffer로 처리해 준 후에는 동일한 절차를 거치시면 될 것 같습니다. 단, 총단백질량을 비교 확인하신 후에 적절한 세포수로 조절하신다면 문제될 것은 없습니다. anti-AMPK Ab를 이용하여 bead에 결합시키는 방법으로 pull-down하는 것이므로 immunoprecipitation과 원리적으로는 유사합니다. >activity 측정시 SAMS peptide 사용해서 activity를 측정하려고 하는데 >attachment cell말고 suspension cell을 가지고 실험 할때는 어떻게 해야 할지요 >protocol은 attachment cell을 가지고 하는 방법 이더라고요 >혹시 suspension cell 가지고 실험 하셨던 분이 있다면 도와주세요 >그리고 AMPK activity는 IP와 비슷한 것인지요? >