2009-03-05
org.kosen.entty.User@6b5dff09
오용식(rockeryosi)
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TAKARA에서 제공하는 CIAP를 사용하고 있는데요..
protocol을 보니 1-20 pmol의 vector를 최종 50 ul ( buffer랑 CIAP 포함)로 하여 37도씨에서 반응 시킨다고 되어있더군요..
1-20 pmol을 계산해보니.. 3 kbp vector를 사용할 경우 약 40 ug 정도가 되던데,, 말이 40 ug이지 제 생각에는 양이 엄청나다고 생각되거든요,
그래서 혹시나 잘못 계산한 것이 아닐까 싶어서 인터넷을 통해서 다른 몇몇 protocol들을 찾아보니... 10-30 ug을 사용한다네요...
그래서 드리는 질문인데...
1. CIAP 처리를 하는데 있어서 vector의 양이 매우 적을 경우 즉, CIAP를 과다하게 사용하였을 경우, 후에 ligation에 문제가 되는 어떠한 현상이 일어나기도 하는지요?
2. 그리고 CIAP 처리를 할때 보통 어느 정도 양의 vector를 사용하는게 좋은지요?
경험있으신 분들의 도움 부탁드립니다.
- CIAP
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
안길홍님의 답변
2010-02-05- 0
첨부파일
>TAKARA에서 제공하는 CIAP를 사용하고 있는데요.. >protocol을 보니 1-20 pmol의 vector를 최종 50 ul ( buffer랑 CIAP 포함)로 하여 37도씨에서 반응 시킨다고 되어있더군요.. >1-20 pmol을 계산해보니.. 3 kbp vector를 사용할 경우 약 40 ug 정도가 되던데,, 말이 40 ug이지 제 생각에는 양이 엄청나다고 생각되거든요, >그래서 혹시나 잘못 계산한 것이 아닐까 싶어서 인터넷을 통해서 다른 몇몇 protocol들을 찾아보니... 10-30 ug을 사용한다네요... >그래서 드리는 질문인데... >1. CIAP 처리를 하는데 있어서 vector의 양이 매우 적을 경우 즉, CIAP를 과다하게 사용하였을 경우, 후에 ligation에 문제가 되는 어떠한 현상이 일어나기도 하는지요? > >2. 그리고 CIAP 처리를 할때 보통 어느 정도 양의 vector를 사용하는게 좋은지요? > >경험있으신 분들의 도움 부탁드립니다. 첨부자료