지식나눔

효모 발현의 scale up

k.lactis를 이용해서 단백질을 발현 중인데요 2ml 배양에서는 (2~3일 지나서) 단백질 발현이 확인되는데, 1L로 배양할 때는 5일이 지나도 발현이 잘 안되네요. 이것에 대해서 조언 좀 부탁드립니다.
  • yeast
  • scale up
  • expression
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답변 1
  • 답변

    신재욱님의 답변

    k.lactis의 단백질 발현체가 안정적이라고 가정하면, 2mL배양시와 1000mL배양시의 발효조건의 차이입니다. 기본적으로 단백질 발현의 경우 scale up에서 lab. scale과 동일하게 발현되지 않기 때문에 배양조건을 맞추어 주셔야 합니다. 즉, 온도, 교반속도, 영양분(C, N source), 유도물질 등등의 조건을 잡아주셔야 합니다. 2mL배양시와 동일하게 적용하셔서는 물론 발현될 경우도 있겠지만, 발현량이 매우 작거나 안되는 경우가 많으니 scale up조건을 확인하시고 실험 matrix를 작성하셔서 시험해 봇기 바랍니다.
    k.lactis의 단백질 발현체가 안정적이라고 가정하면, 2mL배양시와 1000mL배양시의 발효조건의 차이입니다. 기본적으로 단백질 발현의 경우 scale up에서 lab. scale과 동일하게 발현되지 않기 때문에 배양조건을 맞추어 주셔야 합니다. 즉, 온도, 교반속도, 영양분(C, N source), 유도물질 등등의 조건을 잡아주셔야 합니다. 2mL배양시와 동일하게 적용하셔서는 물론 발현될 경우도 있겠지만, 발현량이 매우 작거나 안되는 경우가 많으니 scale up조건을 확인하시고 실험 matrix를 작성하셔서 시험해 봇기 바랍니다.
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