2009-04-29
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방글(rmfdldi)
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광학현미경으로 cell size 관찰시에
어떤 식으로 슬라이드 글라스에 고정시키는지 알고 싶습니다.
고체배지의 cyanobacteria 를 이용해서 관찰하고 싶습니다.
- cyanobacteria
- 광학현미경
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답변 1
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답변
정근일님의 답변
2009-04-29- 0
>광학현미경으로 cell size 관찰시에 > >어떤 식으로 슬라이드 글라스에 고정시키는지 알고 싶습니다. > >고체배지의 cyanobacteria 를 이용해서 관찰하고 싶습니다. 박테리아는 사이즈가 작아서 최소 400배율 이상으로 보시는게 좋습니다. 저는 보통 1000배율로 보는데요 만약 DIC 현미경이라면 사이즈바 넣고 사진으로 찍어서 보시면 되지만; 광학현미경으로 보시려면 조금 번거로운 작업을 하셔야합니다. 셀의 종류에 따라 버퍼나 유기용매로 고정하기도 하지만 그런거 모르겠다 쉽게하겠다 하시면;;ㅡ,.ㅡ 일단 고체배지상에 콜로니가 있다면 이쑤시개나 팁끝으로 조금 뭍혀 슬라이드 글라스 위에 긁습니다. 그런다음 3~4 람다 정도 D.W를 위에 떨어뜨린 후, 이쑤시개나 팁으로 잘 풀어준다음 커버글라스를 덮고 보시면 됩니다. (D.W 양이 많으면 현미경으로 볼때 셀이 둥둥 떠다녀서 보기 힘들어요;) 아마도 질문자 님께서 슬라이드 글라스에 고정하시려는게 셀이 둥둥 떠다녀서 그런것 같은데요. 일반적으로 D.W양이 적으면 그냥 이상태로도 고정이 되서 볼수 있습니다. 확실히 고정하시려면 커버글라스를 덮고 불로 살짝 가열해서 말리는 방법이 있는데요, 이방법은 그을음이나 셀이 타버릴수가 있습니다. 저희 실험실에서는 D.W로 푼다음 커버글라스 주변에 메니큐어를 바르는데요 이러면 슬라이드글라스위에 커버글라스가 움직이지않고 셀이 고정이 되고, 한시간 정도면 D.W가 다 말라 셀이 글라스에 완전히 들러붇은 상태로 고정이되거든요.(드라이오븐에선 10분이면 마름) 이방법을 저희는 가장많이써서 혹시나 참고하시라고 올려드립니다. ^^
정근일(jki3736) 2009-04-29저희 실험실에서는 주로 형태를 보는데 이때 저희가 쓰는 균주는 D.W상에서도 cell이 터지거나 변형이 되지않아서 형태만 볼땐 다른 물질을 첨가해 주지는 않습니다. 만약 D.W상에서 cell이 삼투에 의해 변형되거나 터지면 glycerol을 첨가해도 된다는 군요^^ 박테리아는 20% 부피의 glycerol을 넣어주면 된다고 실험실 동기가 그러네요^^
우선 감사드리고요 ^^
그럼 glycerol 같은 용액을 쓰지 않아도 되는 건가요? ^^