지식나눔

secretion 되는 protein을 간단히 정제할 수 있는 방법을 찾습니다.

제가 bacteria에서 secretion 되는 protein을 SDS-PAGE를 걸어 보려고 합니다. 실제 이 protein을 정제하는 방법은...salting out/dialysis/여러column을 이용하는데 조건을 잡기도 힘들고 시간이 너무나 오래 걸립니다. 그래서 간단히 정제해서 SDS-PAGE를 걸고 싶은데, 제가 생각 했을땐 Sep-pak cartridge를 통과 시키고 농축을 한 후, sameple buffer에 녹여 걸면 안될까 생각하는데;;;; 혹시나 간단한 배지성분 제거법이나 정제법이 있는지 알고싶습니다.
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    이상후님의 답변

    >제가 bacteria에서 secretion 되는 protein을 SDS-PAGE를 걸어 보려고 합니다. >실제 이 protein을 정제하는 방법은...salting out/dialysis/여러column을 이용하는데 >조건을 잡기도 힘들고 시간이 너무나 오래 걸립니다. >그래서 간단히 정제해서 SDS-PAGE를 걸고 싶은데, >제가 생각 했을땐 Sep-pak cartridge를 통과 시키고 농축을 한 후, sameple buffer에 >녹여 걸면 안될까 생각하는데;;;; >혹시나 간단한 배지성분 제거법이나 정제법이 있는지 알고싶습니다. 요즘은 기기적인 방법으로 몇단계의 절차를 줄일 수 있습니다. 예를 들어서, FPLC를 이용해서 정제하는 방법이 가장 보편적이구요..양이 미량일 경우는 nano-LC를 이용하는 방법이 있습니다. 그러나 비용면이나 기기이용면으로 볼때 전자를 추천하고 싶습니다.
    >제가 bacteria에서 secretion 되는 protein을 SDS-PAGE를 걸어 보려고 합니다. >실제 이 protein을 정제하는 방법은...salting out/dialysis/여러column을 이용하는데 >조건을 잡기도 힘들고 시간이 너무나 오래 걸립니다. >그래서 간단히 정제해서 SDS-PAGE를 걸고 싶은데, >제가 생각 했을땐 Sep-pak cartridge를 통과 시키고 농축을 한 후, sameple buffer에 >녹여 걸면 안될까 생각하는데;;;; >혹시나 간단한 배지성분 제거법이나 정제법이 있는지 알고싶습니다. 요즘은 기기적인 방법으로 몇단계의 절차를 줄일 수 있습니다. 예를 들어서, FPLC를 이용해서 정제하는 방법이 가장 보편적이구요..양이 미량일 경우는 nano-LC를 이용하는 방법이 있습니다. 그러나 비용면이나 기기이용면으로 볼때 전자를 추천하고 싶습니다.
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    안길홍님의 답변

    >제가 bacteria에서 secretion 되는 protein을 SDS-PAGE를 걸어 보려고 합니다. >실제 이 protein을 정제하는 방법은...salting out/dialysis/여러column을 이용하는데 >조건을 잡기도 힘들고 시간이 너무나 오래 걸립니다. >그래서 간단히 정제해서 SDS-PAGE를 걸고 싶은데, >제가 생각 했을땐 Sep-pak cartridge를 통과 시키고 농축을 한 후, sameple buffer에 >녹여 걸면 안될까 생각하는데;;;; >혹시나 간단한 배지성분 제거법이나 정제법이 있는지 알고싶습니다. 첨부자료
    >제가 bacteria에서 secretion 되는 protein을 SDS-PAGE를 걸어 보려고 합니다. >실제 이 protein을 정제하는 방법은...salting out/dialysis/여러column을 이용하는데 >조건을 잡기도 힘들고 시간이 너무나 오래 걸립니다. >그래서 간단히 정제해서 SDS-PAGE를 걸고 싶은데, >제가 생각 했을땐 Sep-pak cartridge를 통과 시키고 농축을 한 후, sameple buffer에 >녹여 걸면 안될까 생각하는데;;;; >혹시나 간단한 배지성분 제거법이나 정제법이 있는지 알고싶습니다. 첨부자료
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