2009-07-06
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이성학(lshak01)
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24KDa과 50 KDa의 단백질은 분리할려고 합니다. size chromatography를 이용하려고 하는데 가능할까요.. 아니면 두 단백질을 분리하는데 더 좋은방법은 없습니가?
- protein
- separation
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답변 3
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장성재님의 답변
2009-07-06- 0
좀더 좁은 범위로 질문을 하시는 것이 좋을 것 같습니다. 이론적으로는 물론 가능합니다. 하지만, 단순한 아미노산 서열로만 구성된 단백질이 아니라 다양한 수식을 가진 단백질일 경우, 또는 다량체를 형성하는 단백질일 경우에는 단백질의 세부적인 character를 확인하신 후에 분리 방법을 선택하시는 것이 좋습니다. 우선 size exculsion chromatography를 시도해보시는 것을 추천합니다. size exculsion의 경우도 선택하실 매트릭스의 종류와 사용 범위에 따라서 차이가 날 수 있으므로 하나하나 검토해 나가시는 것이 중요합니다. 위에서 언급해 드렸듯이 SDS-PAGE 상의 단백질 사이즈 밴드와 실제로 단백질의 삼차원적 입체구조 및 chromatography 상의 패턴에는 차이가 있을 수 있습니다. 천연의 단백질 중에서 위에서 언급하신 두가지 단백질만을 분리하실 예정이라면, 좀더 다양한 단백질의 물리 화학적인 특성 부분을 사전에 검토하신 후에 분리 정제 작업을 진행하실 필요가 있습니다. 만약, 재조합 단백질의 분리를 목적으로 하신다면, 가장 손쉽게 분리가 가능한 affinity tag (His, Flag, GST 등등)를 선택하시는 것도 고려하실 필요가 있습니다. >24KDa과 50 KDa의 단백질은 분리할려고 합니다. size chromatography를 이용하려고 하는데 가능할까요.. 아니면 두 단백질을 분리하는데 더 좋은방법은 없습니가? -
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DELETED님의 답변
2009-08-21- 0
>24KDa과 50 KDa의 단백질은 분리할려고 합니다. size chromatography를 이용하려고 하는데 가능할까요.. 아니면 두 단백질을 분리하는데 더 좋은방법은 없습니가? Re: 사이즈 차이를 이용하니, gel filtration이 가장 용이할것 같습니다. 아니면, PAGE gel 을 내려서 gel slice를 elution하는 것은 어떨까요... -
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김범수님의 답변
2010-01-13- 0
>24KDa과 50 KDa의 단백질은 분리할려고 합니다. size chromatography를 이용하려고 하는데 가능할까요.. 아니면 두 단백질을 분리하는데 더 좋은방법은 없습니가? gel filtration column을 이용하여 size에 따른 down loading 차에 따라 분리가 가능할 것 같구요. 아니면 protein의 당분포, 농도를 안다면 lectin-affinity column을 통해서도 분리가 가능할 것 같습니다.