2009-07-09
org.kosen.entty.User@3245ada1
이윤희(yunclub321)
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시료를 농축하여 대장균을 배양하고자 하는데 어떤방법으로 농축을 해야 하나요?
0.45um Metal Filter에 시료를 흘려보내서 농축을 하고자 하는데 가능한 방법인지요?
아니면 다른방법이 있을까요? 만약 농축된다면 필터에 붙어있는 균들을 안전하게
떼어내어 배양을 해야하는데 어떤방법들이 있는지요?
또한 농축에 사용했던 필터를 세정해야 하는데 어떤방법으로 세정을 해야 하나요?
답변 부탁합니다.
- E.Coli
- lysis buffer
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 5
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답변
장성재님의 답변
2009-07-09- 0
어떤 시료를 이용하시는 것 인지요? 처리해야 할 시료의 총량 및 시료 중의 대장균 량에 따라서 차이가 있을 수도 있습니다. 또한, 실험실 레벨이 아닌 대량 프로세스로 매스업 하시기 위한 조건을 검토하시는 것이라면 더더욱 다양한 검토가 필요할 것으로 보입니다. 필터법의 종류 등도 다양하며, 필터의 경우 처리량에 따라서 유속이 급격하게 감소하는 양상을 보이는 경우 및 필터의 재활용 여부 등의 문제점 등도 존재합니다. 다른 분리 농축법으로는 원심분리법도 고려할 수 있습니다. 질문하신 부분에 대해서는 다양한 변수들이 존재하므로, 좀더 구체적으로 질문을 해주시면 좋겠네요. >시료를 농축하여 대장균을 배양하고자 하는데 어떤방법으로 농축을 해야 하나요? > >0.45um Metal Filter에 시료를 흘려보내서 농축을 하고자 하는데 가능한 방법인지요? > >아니면 다른방법이 있을까요? 만약 농축된다면 필터에 붙어있는 균들을 안전하게 > >떼어내어 배양을 해야하는데 어떤방법들이 있는지요? > >또한 농축에 사용했던 필터를 세정해야 하는데 어떤방법으로 세정을 해야 하나요? > >답변 부탁합니다. -
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문동찬님의 답변
2009-07-10- 0
원심분리기를 이용하는 방법이 가장 쉬울거 같네요. 저도 2리터 삼각플라스크에 1리터 키워서 500ml을 5000rpm 30분 돌리면 농축됩니다. 필터기에 균을 떼어내시려면 PBS에 희석하여서 voltex 2분 정도만 하시면 떨어지는데 아무래두 효율이 떨어지겠죠..^^ -
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이윤희님의 답변
2009-07-10- 0
답변감사합니다. 실험실레벨은 아니구요 실제 정수장에서 정수처리된 물 이나 수도꼭지에서 나오는 물을 분석하고자 합니다. 예를들어 수도꼭지에서 대장균이 1~2CFU 있다고 한다면 시료를 필터링해서 농축할수있다고 한다면 1~2CFU가 100~200CFU가 될것이고 이를 배양하면 24시간이 아니라 좀 더 빠른시간에 대장균 존재여부를 판단하고자 합니다. 어떤 방법으로 시료중에 대장균을 농축하는것이 최상인지 좋은 의견 부탁드립니다. -
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최기섭님의 답변
2009-07-10- 0
>시료를 농축하여 대장균을 배양하고자 하는데 어떤방법으로 농축을 해야 하나요? > >0.45um Metal Filter에 시료를 흘려보내서 농축을 하고자 하는데 가능한 방법인지요? > >아니면 다른방법이 있을까요? 만약 농축된다면 필터에 붙어있는 균들을 안전하게 > >떼어내어 배양을 해야하는데 어떤방법들이 있는지요? > >또한 농축에 사용했던 필터를 세정해야 하는데 어떤방법으로 세정을 해야 하나요? > >답변 부탁합니다. 환경시료를 분석하는 방법은 아닌데, 응용할 수 있을 것 같아서 post합니다. membrane filter법 이라고 하는 무균테스트 방법입니다. Membrane filter set에 원하는 양(100 mL ~ 수 L)까지 filtering한 후에 membrane을 그대로 agar plate위에 올려놓으면 colony가 형성되어 확인 할 수 있습니다. 자세한 실험법은 아래 링크를 참고하세요. http://www.ksbb.or.kr/home/kor/sop/test.asp?globalmenu=10&localmenu=5 -
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오용식님의 답변
2009-07-23- 0
>시료를 농축하여 대장균을 배양하고자 하는데 어떤방법으로 농축을 해야 하나요? > >0.45um Metal Filter에 시료를 흘려보내서 농축을 하고자 하는데 가능한 방법인지요? > >아니면 다른방법이 있을까요? 만약 농축된다면 필터에 붙어있는 균들을 안전하게 > >떼어내어 배양을 해야하는데 어떤방법들이 있는지요? > >또한 농축에 사용했던 필터를 세정해야 하는데 어떤방법으로 세정을 해야 하나요? > >답변 부탁합니다. 저희 실험실에서는 nalgene사의 bottle top filter를 사용하구요, membrane filter는 pore size : 0.2 um, diameter : 47mm 를 사용합니다.. 환경시료로부터 filter하여 농축하실거라면... 아마 굉장히 오랜 시간이 필요하실 듯///
답변 감사합니다. 좀더 자세하게 질문 드립니다.