2009-07-15
org.kosen.entty.User@3481e96d
김수희(iceblack)
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또 질문이 있어서 이렇게 올립니다.
제가 가지고 있는 Antibody와 protein이 mono가 아니라 poly입니다.
그래서 그런지 자꾸 짝이 아닌데 반응을 하게 됩니다.
즉, specificity가 떨어집니다.
실험을 다음 단계로 진행하려면 이 specificity와 selectivity가 좋아야하는데 어떻게 해야할지 모르겠습니다.
금 표면에 antibody를 붙이고 antigen을 붙이는데 이를 해결하기 위해서
SAM반응에 PEG를 사용해보려고 하는데 그것마저도 잘 되지 않습니다.
뭐, 좋은 방법 없을까요?
- antibody
- antigen
- binding
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 3
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답변
장성재님의 답변
2009-07-15- 0
현재 가지고 계신 항체가 monoclonal Ab가 아닌 polyclonal Ab란 말씀이시네요. 그렇다면, 항원과 항체의 특이성을 높여주기 위해서는 항원을 결합시킨 resin을 제작하여, 즉, affinity chromatography를 이용하여 항원에 특이적인 항체만을 정제하신 후 실험을 진행하시는 것이 좋습니다. > > >또 질문이 있어서 이렇게 올립니다. > >제가 가지고 있는 Antibody와 protein이 mono가 아니라 poly입니다. >그래서 그런지 자꾸 짝이 아닌데 반응을 하게 됩니다. >즉, specificity가 떨어집니다. > >실험을 다음 단계로 진행하려면 이 specificity와 selectivity가 좋아야하는데 어떻게 해야할지 모르겠습니다. >금 표면에 antibody를 붙이고 antigen을 붙이는데 이를 해결하기 위해서 >SAM반응에 PEG를 사용해보려고 하는데 그것마저도 잘 되지 않습니다. >뭐, 좋은 방법 없을까요? -
답변
유형석님의 답변
2009-07-15- 0
poly antibody를 protein A로 정제를 하셨는지? 안하셨다면 정제를 해서 사용하심이 좋을 것 같네요^^ > >또 질문이 있어서 이렇게 올립니다. > >제가 가지고 있는 Antibody와 protein이 mono가 아니라 poly입니다. >그래서 그런지 자꾸 짝이 아닌데 반응을 하게 됩니다. >즉, specificity가 떨어집니다. > >실험을 다음 단계로 진행하려면 이 specificity와 selectivity가 좋아야하는데 어떻게 해야할지 모르겠습니다. >금 표면에 antibody를 붙이고 antigen을 붙이는데 이를 해결하기 위해서 >SAM반응에 PEG를 사용해보려고 하는데 그것마저도 잘 되지 않습니다. >뭐, 좋은 방법 없을까요?
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답변
서기원님의 답변
2009-07-20- 0
윗분들 대답이 정제해서 사용하는 방법을 추천하셨는데요.. 전 생각이 좀 다름니다. 먼저 affinity chr- 는 사용할만한 방법이긴 하나 단백질 정제 기술이 잘 정립된 실험실이나 사람이 아니라면.. 쉬운 방법은 아닙니다. resine을 제작하고 항원의 purity도 문제가 될수 있구요. 가능한 방법이지만 비추입니다. 두번째 답변인 protein A는 좀 그렇습니다.. protein A 는 antibody type에 따라 친화도가 다르긴 하지만 antibody와 붙은 물질입니다. 어쨋든 항체가 모두 정제되어진다는 얘김니다. 그러면 cross activity가 있는 항체의 항원 specific antibody만을 분리하는것은 무리가 있는 실험입니다. cross reaction 를 없애기 위해서는 mono를 구입 혹은 제조- 젤 간단하고 빠르죠. 이니면 주사된 항원의 순도를 높여서 다시 poly 제조하거나 항원의 일부만을 주사해서 poly의 레퍼토어를 줄이는 법, 등 여러 방법등이 있습니다... 또한 구입한 poly 항체라면 다른 회사 제품을 구입하시던지(믿을 수 있는 회사라구 다 믿을수 있는건 아님니다.) 어쨋든 여러 방법이 있는데요.. 이런것은 실험에 대한 좀더 자세한 이해가 필요하네요.. 말씀하신 내용으로는 해결책을 말씀드리는게.. 좀 이곳보다는 주위에서 믿을만한 분과 직접 말씀을 나누어 보는게./.
감사합니다.