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mtt 할 때~~

mtt assay 할 때 처리 할 약물을 0.1% dmso에 녹이려고 합니다 0.1% dmso를 만들 때 그냥 dw와 희석 해서 쓰면 되나요??
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    김범수님의 답변

    >mtt assay 할 때 처리 할 약물을 0.1% dmso에 녹이려고 합니다 > >0.1% dmso를 만들 때 그냥 dw와 희석 해서 쓰면 되나요?? 네...증류수로 희석해서 농도 맞추고 쓰시면 됩니다. ^^
    >mtt assay 할 때 처리 할 약물을 0.1% dmso에 녹이려고 합니다 > >0.1% dmso를 만들 때 그냥 dw와 희석 해서 쓰면 되나요?? 네...증류수로 희석해서 농도 맞추고 쓰시면 됩니다. ^^
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    장성재님의 답변

    질문이 약간 모호한데요. 처리할 약물이 무엇인가요? MTT 시약을 지칭하시는 것인지? 아니면, 테스트하실 특정 약물을 의미하시는 것이신지? 전자의 경우 MTT 시약은 DW 혹은 배지에도 5-10mg/mL로 녹이실 수 있습니다. 후자의 경우 물에 녹지 않는 고농도의 약물을 처리하시지 않을 경우에는 DMSO 또는 ethanol 등에 고농도로 녹이신 후 희석하여 처리하시는 것이 일반적인 방법입니다. 물론 이때에는 대조군에 각 solvent를 동일한 농도로 처리해주시는 것이 기본입니다. 질문이 전자일 경우, 최근에는 세포 독성이나 cell proliferation (viability)를 측정하는 방법으로 불용성의 crystal formazan을 형성하는 MTT 시약보다는 MTS 등의 수용성 crystal formazan을 형성하는 시약이 주로 사용하며, (3H)-thymidine 결합 측정법 대신에 non-RI로 재현성있는 결과를 낼 수 있습니다. (WST-1 kit나 MTS kit를 검색해보시길 바랍니다.) >mtt assay 할 때 처리 할 약물을 0.1% dmso에 녹이려고 합니다 > >0.1% dmso를 만들 때 그냥 dw와 희석 해서 쓰면 되나요??
    질문이 약간 모호한데요. 처리할 약물이 무엇인가요? MTT 시약을 지칭하시는 것인지? 아니면, 테스트하실 특정 약물을 의미하시는 것이신지? 전자의 경우 MTT 시약은 DW 혹은 배지에도 5-10mg/mL로 녹이실 수 있습니다. 후자의 경우 물에 녹지 않는 고농도의 약물을 처리하시지 않을 경우에는 DMSO 또는 ethanol 등에 고농도로 녹이신 후 희석하여 처리하시는 것이 일반적인 방법입니다. 물론 이때에는 대조군에 각 solvent를 동일한 농도로 처리해주시는 것이 기본입니다. 질문이 전자일 경우, 최근에는 세포 독성이나 cell proliferation (viability)를 측정하는 방법으로 불용성의 crystal formazan을 형성하는 MTT 시약보다는 MTS 등의 수용성 crystal formazan을 형성하는 시약이 주로 사용하며, (3H)-thymidine 결합 측정법 대신에 non-RI로 재현성있는 결과를 낼 수 있습니다. (WST-1 kit나 MTS kit를 검색해보시길 바랍니다.) >mtt assay 할 때 처리 할 약물을 0.1% dmso에 녹이려고 합니다 > >0.1% dmso를 만들 때 그냥 dw와 희석 해서 쓰면 되나요??
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    홍동호님의 답변

    >mtt assay 할 때 처리 할 약물을 0.1% dmso에 녹이려고 합니다 > >0.1% dmso를 만들 때 그냥 dw와 희석 해서 쓰면 되나요?? * 0.1% DMSO라고 하는 말은 최종농도를 의미 합니다. 1. 시험물질을 100% DMSO에 녹입니다. 예를 들면 최고농도를 10 mg/ml이라고 한다면 시험물질 10 mg에 DMSO 1 ml에 녹입니다. 그리고 다음 농도를 3, 1, 0.3, 0.1 mg/ml이라고 한다면 DMSO를 가지고 희석을 합니다. 이와 같은 희석한 농도를 Stock solution이라고 합니다. 2. 시험물질을 배양액에 들어 있는 세포에 처리한다고 하면, Stock solution을 배양액을 이용하여 약 100 정도 희석합니다. 예를 들면 10 mg/ml (in 100% DMSO)를 배양액 990 ul에 10 ul를 넣으면 100 배 희석이 됩니다. 다른 Stock solution도 이와 같이 희 석을 합니다. 3. 이와 같이 희석한 용액을 세포가 96-well plate에 일정농도로 loading되어 있고 들어있는 배양액이 180 ul이라고 하면 위에서 희석한 용액(stock solution을 배양액으로 희석한 액)을 20 ul을 처리합니다. 그렇게 하면 최종적으로 1000 배 희석이 되었습니다. 그래서 0.1% DMSO라는 표현을 씁니다.
    >mtt assay 할 때 처리 할 약물을 0.1% dmso에 녹이려고 합니다 > >0.1% dmso를 만들 때 그냥 dw와 희석 해서 쓰면 되나요?? * 0.1% DMSO라고 하는 말은 최종농도를 의미 합니다. 1. 시험물질을 100% DMSO에 녹입니다. 예를 들면 최고농도를 10 mg/ml이라고 한다면 시험물질 10 mg에 DMSO 1 ml에 녹입니다. 그리고 다음 농도를 3, 1, 0.3, 0.1 mg/ml이라고 한다면 DMSO를 가지고 희석을 합니다. 이와 같은 희석한 농도를 Stock solution이라고 합니다. 2. 시험물질을 배양액에 들어 있는 세포에 처리한다고 하면, Stock solution을 배양액을 이용하여 약 100 정도 희석합니다. 예를 들면 10 mg/ml (in 100% DMSO)를 배양액 990 ul에 10 ul를 넣으면 100 배 희석이 됩니다. 다른 Stock solution도 이와 같이 희 석을 합니다. 3. 이와 같이 희석한 용액을 세포가 96-well plate에 일정농도로 loading되어 있고 들어있는 배양액이 180 ul이라고 하면 위에서 희석한 용액(stock solution을 배양액으로 희석한 액)을 20 ul을 처리합니다. 그렇게 하면 최종적으로 1000 배 희석이 되었습니다. 그래서 0.1% DMSO라는 표현을 씁니다.
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    진수언님의 답변

    약물을 다양한 concentration으로 쓰실 것인지 모르겠습니다만, 여쭤보신 것에 답변을 드리자면 보통 약물을 DMSO에 녹이고 세포에 처리할 때 0.1% DMSO가 되도록 배지에 희석해서 사용합니다. >mtt assay 할 때 처리 할 약물을 0.1% dmso에 녹이려고 합니다 > >0.1% dmso를 만들 때 그냥 dw와 희석 해서 쓰면 되나요??
    약물을 다양한 concentration으로 쓰실 것인지 모르겠습니다만, 여쭤보신 것에 답변을 드리자면 보통 약물을 DMSO에 녹이고 세포에 처리할 때 0.1% DMSO가 되도록 배지에 희석해서 사용합니다. >mtt assay 할 때 처리 할 약물을 0.1% dmso에 녹이려고 합니다 > >0.1% dmso를 만들 때 그냥 dw와 희석 해서 쓰면 되나요??
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