지식나눔

nucleus-cytosol fraction실험시 정량은?

nucleus와 cytosol 분리 실험을 하였는데요 cytosol의 정량으로는 b-actin을 보면 되는데 nucleus에서는 b-actin이 발현이 되면 안되는 것이 아닌가요? nucleus에서는 정량이 잘 되었다는 것을 어떤 단백질을 보아야 하나요?
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답변 1
  • 답변

    장성재님의 답변

    핵과 세포질을 분리하실 때 어떤 방법을 사용하셨나요? 시판되고 있는 cell fractionation 키트를 사용하셨다면 manual에 언급된 validation에 사용한 마커를 이용하시는 것도 좋습니다. 1. 핵 분획에서 b-actin이 검출되었다면 분획법에 문제가 있다고 볼 수 있습니다. 2. 일반적으로 모든 세포에서 존재하는 structural protein을 마커로 사용하시는 것이 좋습니다. 예) b-actin, GAPDH, tubulin, Lamin A/C, Histone etc. 또는, 특정한 세포를 이용하신다면, 현재 연구에 사용하시는 세포를 이용한 cell fraction 연구 논문을 검색하신 후 그 논문을 참조하시는 것도 한 방법이 될 수 있습니다. >nucleus와 cytosol 분리 실험을 하였는데요 > >cytosol의 정량으로는 b-actin을 보면 되는데 > >nucleus에서는 b-actin이 발현이 되면 안되는 것이 아닌가요? > >nucleus에서는 정량이 잘 되었다는 것을 어떤 단백질을 보아야 하나요?
    핵과 세포질을 분리하실 때 어떤 방법을 사용하셨나요? 시판되고 있는 cell fractionation 키트를 사용하셨다면 manual에 언급된 validation에 사용한 마커를 이용하시는 것도 좋습니다. 1. 핵 분획에서 b-actin이 검출되었다면 분획법에 문제가 있다고 볼 수 있습니다. 2. 일반적으로 모든 세포에서 존재하는 structural protein을 마커로 사용하시는 것이 좋습니다. 예) b-actin, GAPDH, tubulin, Lamin A/C, Histone etc. 또는, 특정한 세포를 이용하신다면, 현재 연구에 사용하시는 세포를 이용한 cell fraction 연구 논문을 검색하신 후 그 논문을 참조하시는 것도 한 방법이 될 수 있습니다. >nucleus와 cytosol 분리 실험을 하였는데요 > >cytosol의 정량으로는 b-actin을 보면 되는데 > >nucleus에서는 b-actin이 발현이 되면 안되는 것이 아닌가요? > >nucleus에서는 정량이 잘 되었다는 것을 어떤 단백질을 보아야 하나요?
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