2009-10-22
org.kosen.entty.User@1baf742d
황혜정(dianastar)
- 2
FACS로 apoptosis를 확인 할때 cell cycle 분석에서..Sub G1 arrest를 확인하잖아요.왜 Sub G1이 arrest되는 것을 apoptosis가 일어 났다고 하는지요?
이렇게 apoptosis가 일어 난것을 western으로 확인하고자 합니다
Bax를 확인하는 거랑 caspase3&cleaved caspase-3확인하는 것
이 둘 중에 어떤 것을 확인하는게 좋은지요?
- apoptosis
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 2
-
답변
장성재님의 답변
2009-10-22- 2
세포의 핵을 PI (propium iodide)로 염색한 후 FACS로 분석한 결과는 일반적으로 두개의 peak가 뜹니다. 첫번째 peak는 염색체 2n을 의미하고, 두번째 peak는 4n을 의미합니다. 이것을 각각 cell cycle 상의 G1 phase, G2/M phase을 구분하며, 두 peak의 사이를 S phase, 그리고 G1 phase보다 앞에 나오는 peak를 sub-G1 phase라고 부릅니다. 즉, PI의 intensity가 2n보다 작은 경우에는 DNA가 fragmentation 된 것으로 볼 수 있으며, 이는 apoptosis가 일어났다고 예상할 수 있겠습니다. FACS를 이용하여 Apoptosis의 characterization 및 qunatification을 할 경우 annexin V/PI를 사용하시면 됩니다. >FACS로 apoptosis를 확인 할때 cell cycle 분석에서..Sub G1 arrest를 확인하잖아요.왜 Sub G1이 arrest되는 것을 apoptosis가 일어 났다고 하는지요? > >이렇게 apoptosis가 일어 난것을 western으로 확인하고자 합니다 >Bax를 확인하는 거랑 caspase3&cleaved caspase-3확인하는 것 >이 둘 중에 어떤 것을 확인하는게 좋은지요? -
답변
채성욱님의 답변
2009-10-22- 0
>FACS로 apoptosis를 확인 할때 cell cycle 분석에서..Sub G1 arrest를 확인하잖아요.왜 Sub G1이 arrest되는 것을 apoptosis가 일어 났다고 하는지요? > >이렇게 apoptosis가 일어 난것을 western으로 확인하고자 합니다 >Bax를 확인하는 거랑 caspase3&cleaved caspase-3확인하는 것 >이 둘 중에 어떤 것을 확인하는게 좋은지요? 저의 경우는 caspase 9 (proform), caspase 3(cleaved form), PARP (cleaved form)의 3종 세트를 했습니다.
황혜정(dianastar) 2009-10-23저는 final하게는 cleaved caspase-3만 확인해두 될거라고 생각했거든요..
만약에 caspase3을 본다면 cleaved caspase-3 역시 동시에 확인해야 겠지요?
답변 감사 합니다