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지식나눔

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Real time PCR-melt graph

2009-12-16 org.kosen.entty.User@229a9ea5 유은혜(blueeh1004)
  • 1

첨부파일

Real time PCR 결과 분석 중, melt 그래프가 왜 이렇게 나오는지 첨부 파일 확인 후 설명 좀 부탁드려요.
  • Real time PCR
  • melt
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답변 1
  • 답변

    DELETED님의 답변

    2010-01-02
    • 0
    >Real time PCR 결과 분석 중, >melt 그래프가 왜 이렇게 나오는지 첨부 파일 확인 후 설명 좀 부탁드려요. Re: 그래프가 그렇게 그려지는 것은 수학적인 방법으로 그린것이기에 그런것이구요..쉽게 생각하자면, signal이 최고점에서 peak가 생긴다고 생각하면 됩니다. reaction이 끝난후에 온도를 서서히 올리면서 amplicon의 denaturation 시점을 보는 것입니다. 만약 peak가 두개라면 product가 두가지라는 얘기가 되고, 그때의 data 는 믿을 수 없습니다. product 간의 Tm 값이 다를테니 denaturation 되는 시점이 달라서 두개의 peak로 보이는 것입니다. 반드시 one peak가 생겨야 그 때의 값을 신뢰할수 있는 것이죠.
    답변수정
    >Real time PCR 결과 분석 중, >melt 그래프가 왜 이렇게 나오는지 첨부 파일 확인 후 설명 좀 부탁드려요. Re: 그래프가 그렇게 그려지는 것은 수학적인 방법으로 그린것이기에 그런것이구요..쉽게 생각하자면, signal이 최고점에서 peak가 생긴다고 생각하면 됩니다. reaction이 끝난후에 온도를 서서히 올리면서 amplicon의 denaturation 시점을 보는 것입니다. 만약 peak가 두개라면 product가 두가지라는 얘기가 되고, 그때의 data 는 믿을 수 없습니다. product 간의 Tm 값이 다를테니 denaturation 되는 시점이 달라서 두개의 peak로 보이는 것입니다. 반드시 one peak가 생겨야 그 때의 값을 신뢰할수 있는 것이죠.
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