2009-12-23
org.kosen.entty.User@259797c4
이미진(myjc7)
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일반적으로 nonpolar한 물질을 LC/MS 분석할 때 C18 column 을 사용하여 분석할려고 합니다.
사용하는 buffer 는 무엇이 필요할까요?
nonpolar 한 물질 분석한 chromatogram 에서 Peak 를 샤프 하게 만들고 싶은데 어떻게 해야하는지 방법들을 알려주세요
부탁드릴게요
- LC/MS
- nonpolar
- peak
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 3
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답변
조윤환님의 답변
2009-12-23- 2
사실 앞서 질문하신 polar한 물질 분석에 대한 내용도 그렇고 이번 질문도 참 막연하다는 생각이 듭니다. 특별히 대상 물질이 무엇이다 언급해주시면 더 많은 답변을 얻을 수 있을 거라 생각합니다. 사실 분석방법(특히 이동상 조성)을 개발하는데 있어 어떤 물질엔 어떤 이동상을 쓰고, 또 이런 물질엔 이런 이동상을 쓴다는 일반화된 룰은 없다고 봐야 옳겠습니다. 분석법 개발에 경험이 중요하게 작용하는 것도 이런 이유일 겁니다. 제 개인적으론 구조적으로 가장 유사한 물질의 예를 찾아서 그 조건을 다듬어보는 것이 가장 좋은 접근 방식이라고 생각합니다. 정확히 그 물질에 대한 것이라면 다듬을 필요도 없겠죠. 앞선 질문의 답변에 한 가지 덧붙이고 싶은 내용은 극성 물질의 경우 retention을 높이기 어려울 경우 선택할 수 있는 방법 중 하나는 ion pairing reagent를 사용하는 것입니다. 극성물질은 분리가 되기도 전에 컬럼을 빠져나와 버리는 경우도 있기 때문에 retention을 높여야 좋은 분석을 할 수 있기 때문이죠. ion pairing chromatography에 대해 언급하자면 책 한권 분량이라 여기서 말씀드리긴 어렵네요. -
답변
이상후님의 답변
2009-12-23- 2
>일반적으로 nonpolar한 물질을 LC/MS 분석할 때 C18 column 을 사용하여 분석할려고 합니다. > >사용하는 buffer 는 무엇이 필요할까요? > >nonpolar 한 물질 분석한 chromatogram 에서 Peak 를 샤프 하게 만들고 싶은데 어떻게 해야하는지 방법들을 알려주세요 > >부탁드릴게요 Nonpolar 물질 분리시에 사용하는 mobile phase는 딱히 정해져 있지는 않지만, 보통 reverse phase mode를 적용하여 분리하고 있습니다. 즉, 고정상이 ODS(C18) 같은 비극성 고정상에 이동상은 물, 메탄올, acetonitrile같은 극성 용매를 사용합니다. 이동상은 물 대신에 ammonium formate나 ammonium acetate와 methanol 또는 acetonitrile를 적정 비율로 혼합하여 사용합니다. 앞서 polar 물질과 비슷하게 peak를 sharp하게 만들기 위해서는 여러 parameter가 관여하는데, acid의 첨가나 LC column, 컬럼 온도, buffer pH 등을 조절하여 조건 수립을 할 수 있습니다. 다만 주의할 것은 LC/MS분석용 mobile phase에 사용하는 buffer로 borate나 phosphate같은 고온에서 non-volatile한 buffer는 사용해선 안됩니다. -
답변
안길홍님의 답변
2010-02-01- 0
>일반적으로 nonpolar한 물질을 LC/MS 분석할 때 C18 column 을 사용하여 분석할려고 합니다. > >사용하는 buffer 는 무엇이 필요할까요? > >nonpolar 한 물질 분석한 chromatogram 에서 Peak 를 샤프 하게 만들고 싶은데 어떻게 해야하는지 방법들을 알려주세요 > >부탁드릴게요 첨부자료