2010-01-06
org.kosen.entty.User@4697513e
이미진(myjc7)
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LC/MS 분석 시 acid 한 물질을 분석하려고 합니다.
buffer 를 사용하고 싶은데
acid 한 것과 base form 시약 중 어느 것을 사용하는 것이 효과적일까요?
컬럼은 C18 을 사용하고 있습니다.
답변 부탁드리겠습니다.^^
- LC/MS
- acid
- bsae
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답변 3
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답변
이상후님의 답변
2010-01-06- 2
>LC/MS 분석 시 acid 한 물질을 분석하려고 합니다. > >buffer 를 사용하고 싶은데 > >acid 한 것과 base form 시약 중 어느 것을 사용하는 것이 효과적일까요? > >컬럼은 C18 을 사용하고 있습니다. > >답변 부탁드리겠습니다.^^ > Acidic compound를 LC/MS에서 분석하고자 할 경우 적합한 buffer로는 basic 보다는 acid가 포함되어 있는 buffer가 분해능 향상에 좋습니다. 적합한 buffer로는 물속에 5 ~ 10 mM의 농도가 되도록 ammonium formate나 ammonium acetate을 녹인 buffer가 LC/MS나 LC/MS/MS용 buffer로 가장 적합한 buffer로 널리 알려져 있습니다. 이러한 buffer류와 acetonitrile이나 methanol같은 유기 용매를 적정 비율로 혼합하여 LC mobile phase로 사용하시면 됩니다. 윗 분이 답변한 phosphate buffer는 LC/MS에서 절대 사용해서는 안될 buffer입니다. 왜냐하면 phosphate ion는 MS상에서 vaporization되지 않기 때문에 mass filter의 심각한 contamination을 유발시키기 때문입니다. 이 점 꼭 숙지하시고 실험이 임하시길 바랍니다. -
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안길홍님의 답변
2010-01-06- 0
Phosphate 또는 Acetic acid buffer를 사용하면 될 것입니다. Phosphate : 20mM NH4H2PO4(pH3.2)/Methanol = 60/40 flow rate : 0.2ml/min Temp: 37C Detection: U at 280nm Injection : 0.015-0.2mg/ml Acetic acid : 1% Aceetic acid/Methanol = 60/40 조건을 동일함. -
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정홍래님의 답변
2010-01-07- 0
>LC/MS 분석 시 acid 한 물질을 분석하려고 합니다. > >buffer 를 사용하고 싶은데 > >acid 한 것과 base form 시약 중 어느 것을 사용하는 것이 효과적일까요? > >컬럼은 C18 을 사용하고 있습니다. > >답변 부탁드리겠습니다.^^ lc/ms에서 base form 형태의 buffer을 사용하시고 ph는 분석물질의 pka값보다 2높게 사용한 것이 좋읍니다. 주로사용하는 buffer는 암모늄 아세테이트와 암모늄 퍼메이트를 5mM에서 10mM사용하시면 됩니다. > >