2010-01-20
org.kosen.entty.User@6d86c422
이광렬(intel444)
- 1
세균에서 polyketide/non ribosomal peptide 분리하기 위해 여러번의 컬럼 work 을 통하여 normal phase 에서 Bu:Me:W (4:1:2) 조건으로 전개 하였을 때 active compound 가 분리가 되고, Bio-Autography 에서도 활성 부위가 검출이 되었는데 Reverse phase 에서 도저히 조건이 안 잡힙니다. 우선 Butanol 을 쓸 수가 없기에, Me 과 ACN 을 각각 Water 과 Gradient 하여 전개 해 보았지만 역시 50% ANC 에서만 올라갔고, 활성부위가 검출 안되었습니다.
혹.. 관련하여 고수님들의 용매 선정부터 많은 조언 부탁 드립니다.
참고로 antifungal activity 로 bio-autography 했습니다.
- polyketide/non ribosomal peptide
- TLC
- burkholderia
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변!
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
-
답변
이상후님의 답변
2010-01-20- 0
>세균에서 polyketide/non ribosomal peptide 분리하기 위해 여러번의 컬럼 work 을 통하여 normal phase 에서 Bu:Me:W (4:1:2) 조건으로 전개 하였을 때 active compound 가 분리가 되고, Bio-Autography 에서도 활성 부위가 검출이 되었는데 Reverse phase 에서 도저히 조건이 안 잡힙니다. 우선 Butanol 을 쓸 수가 없기에, Me 과 ACN 을 각각 Water 과 Gradient 하여 전개 해 보았지만 역시 50% ANC 에서만 올라갔고, 활성부위가 검출 안되었습니다. >혹.. 관련하여 고수님들의 용매 선정부터 많은 조언 부탁 드립니다. >참고로 antifungal activity 로 bio-autography 했습니다. 우선 Plate 자체를 C18 reverse-phase 를 사용해 보세요. Reverse-phase mode에서는 단순 isocratic으로는 쉽게 분리가 안될 것입니다. 분석 물질 자체가 peptide계열이기 때문이죠..따라서 0.05% formic acid를 소량 첨가한 물에 5-95% ACN(v/v)으로 gradient로 테스트를 해보시기 바랍니다.
알겠습니다 .. 그리고 .. 결과보고 댓글 달도록 하겠습니다 ..
참고로 물질 검출은 Ninhydrin 방법을 병행 했었는데 ..