2010-01-20
org.kosen.entty.User@5a0d36b3
김소희(rlathgml2)
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DMEM/F12 media를 세포배양시 사용하는데요.
책자에는 NaHCO3용량 때문에 7% CO2 조건이 좋다고 하더라고요.
교수님께서 세포와 CO2 농도(%)에 따른 growth를 측정해 보고 싶다고 하셨는데요..
media를 인큐베이터에 넣은 후 pH안정화가 되나요??
지금 논문 등을 찾아보고 있는데
어떤 논문에서는 10분, 6시간, 17시간 등등 많더라고요
제 생각에는 NaHCO3 가 CO2가 만나서 pH변화가 일어나는(버퍼링)
그리 길진 않을 것 같은데..
죄송하지만 실험 plan짜기 위해 부탁드립니다.
- pH
- NaHCO3
- media
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답변 3
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답변
장재우님의 답변
2010-01-20- 2
우선 저희 실험실은 줄기세포를 연구실이고요 cell도 많이 구입해서 쓰는데요 같이 딸려오는 설명서를 보면 cell을 뿌리기 전에 media를 인큐베이터에 최소한 30분 이상을 권하고 있습니다. 개인적으로도 그 정도 시간이 소요된다고 생각합니다. 왜냐면 배지를 바깥에 꺼내뒀을때 media가 짙은 자줏빛으로 변하는 시간은 그리 길지 않거든요. 반대로 말하면 CO2가 media에 스며들어가 PH를 안정화시키는(culture조건에 맞는) 시간 역시 그와 비슷 하다고 생각 합니다.. 아니면 그냥 dish에 media를 넣고 인큐베이터에서 overnight시키고 다음날 새로운 배지를 또 넣어서 전에 넣어뒀던 media하고 색깔이 얼마나 비슷해지는지 아실수 있을 겁니다.. DMEM/f12를 처음 구입했을때 주황색 비슷하기때문에 금방 보이거든요. 참고가 되셨는지 모르겠네요 그럼 수고하세요 -
답변
이상후님의 답변
2010-01-20- 2
>DMEM/F12 media를 세포배양시 사용하는데요. > >책자에는 NaHCO3용량 때문에 7% CO2 조건이 좋다고 하더라고요. > >교수님께서 세포와 CO2 농도(%)에 따른 growth를 측정해 보고 싶다고 하셨는데요.. > >media를 인큐베이터에 넣은 후 pH안정화가 되나요?? > >지금 논문 등을 찾아보고 있는데 > >어떤 논문에서는 10분, 6시간, 17시간 등등 많더라고요 > >제 생각에는 NaHCO3 가 CO2가 만나서 pH변화가 일어나는(버퍼링) > >그리 길진 않을 것 같은데.. > >죄송하지만 실험 plan짜기 위해 부탁드립니다. > > > 논문에서 10분, 6시간, 17시간의 시간 variation은 사용한 CO2의 percentage에 기인하는거 같습니다. 즉, CO2로 saturation에 필요한 일정 시간이 필요한데, CO2의 농도가 높을 수록 equilibration 시간이 단축되어질 것입니다.
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답변
안길홍님의 답변
2010-01-21- 0
>DMEM/F12 media를 세포배양시 사용하는데요. > >책자에는 NaHCO3용량 때문에 7% CO2 조건이 좋다고 하더라고요. > >교수님께서 세포와 CO2 농도(%)에 따른 growth를 측정해 보고 싶다고 하셨는데요.. > >media를 인큐베이터에 넣은 후 pH안정화가 되나요?? > >지금 논문 등을 찾아보고 있는데 >>어떤 논문에서는 10분, 6시간, 17시간 등등 많더라고요 첨부 자료를 참고바랍니다. >제 생각에는 NaHCO3 가 CO2가 만나서 pH변화가 일어나는(버퍼링) > >그리 길진 않을 것 같은데.. > >죄송하지만 실험 plan짜기 위해 부탁드립니다. > > >
저도 시간이 짧을거라 생각하고 있었습니다. 선생님께서 말씀하신 방법도 정말 좋겠네요; 정말 감사합니다. 좋은 하루 되세요~^ㅡ^