2010-01-22
org.kosen.entty.User@3b0e2913
이병찬(chan000z)
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폐조직에 TUNEL 염색을 한 후 apoptosis를 확인하는데
염색된 세포를 어떤 방법으로 카운팅하고 통계를 내야할지 모르겠습니다
관련 자료들과 설명등 많은 도움 부탁드립니다.
즐거운 하루 되세요~^^
- apoptosis
- TUNEL
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 2
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답변
이상후님의 답변
2010-01-22- 2
>폐조직에 TUNEL 염색을 한 후 apoptosis를 확인하는데 > >염색된 세포를 어떤 방법으로 카운팅하고 통계를 내야할지 모르겠습니다 > >관련 자료들과 설명등 많은 도움 부탁드립니다. > >즐거운 하루 되세요~^^ "신경모세포종에서 CD44, Bcl-2, PCNA의 발현 및 세포고사와 Shimada 조직소견과의 상관관계"란 제목의 저널에서 apotosis를 확인하는 방법으로 tunel 염색 후 cell counting하는 실험법을 아래와 같이 소개해 드립니다. - TUNEL (modified TdT-mediated dUTP nick end-labeling) method를 이용하여 세포고사를 검색함. - 파라핀 포매를 3μm 두께로 자른 후 phosphate-buffered saline에 15분간 섭씨 25도에서 proteinase K (20μm/mL)와 함께 배양함. - Endogenous peroxidase를 중화시키기 위하여, 0.01% 과산화수소수를 포함한 PBS를 이용함. - 각각의 절편들은 digoxinegin-d-UTP의 존재하에 TdT enzyme과 함께 배양됨. - PBS에서 수세한 후에 peroxidase에 결합된 antidigoxigenin antibody와 함께 배양됨. - Di-aminobenzidine-hydrogen peroxidase를 이용하여 peroxidase의 존재여부를 알아내었고, 여기에 light Mayer's hematoxylin을 이용하여 대조염색을 시행함. - 400배 시야에서 양성으로 염색된 세포들의 퍼센트를 계산함. - 각각의 슬라이드당 임의로 10∼20개의 field에서 최소한 1,000개의 세포를 헤아린 후 세포고사 지수를 구하여 평균값을 구함. -
답변
안길홍님의 답변
2010-01-22- 0
>폐조직에 TUNEL 염색을 한 후 apoptosis를 확인하는데 > >염색된 세포를 어떤 방법으로 카운팅하고 통계를 내야할지 모르겠습니다 > >관련 자료들과 설명등 많은 도움 부탁드립니다. > >즐거운 하루 되세요~^^ 자료 첨부
감사합니다~^^