2010-02-05
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안현주(guswn1206)
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retrovirus concentration을 시켜야 하는데 조건을 잡고싶습니다.
10의 6승 이상의 타이터를 기ㄷ대하고 농축을 하는거거든요 ..
ultra centri를 사용하고있긴한데 생각만큼 되지 않아서요 ..
보다 정확한조건에 대해 알고싶습니다 또는 레트로 바이러스 만들때 주의사항을 알려주세요
- retrovirus
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답변 1
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답변
이상후님의 답변
2010-02-05- 1
>retrovirus concentration을 시켜야 하는데 조건을 잡고싶습니다. >10의 6승 이상의 타이터를 기ㄷ대하고 농축을 하는거거든요 .. >ultra centri를 사용하고있긴한데 생각만큼 되지 않아서요 .. >보다 정확한조건에 대해 알고싶습니다 또는 레트로 바이러스 만들때 주의사항을 알려주세요 두가지 방법이 있습니다. Ultracentrifuge를 사용하는 방법과 전용 농축기를 사용하는 방법이 있습니다. Ultracentrifuge를 사용할 경우에는 CsCl(주로 권장)과 sucrose를 이용하여 ultracetrifuge를 하시되, 2회 정도 하시고 dialysis후에 RCA를 확인하고 titer 측정하시면 됩니다. 전용 농축기를 사용할 계획이면, 최근에 titer를 높일 수 있는 전용 kit들이 많이 나와 있습니다. 그중에서 하나만 소개해 드리면, retrovirus 전용 농축기를 사용하는 방법을 추천해 드리고 싶습니다. T사의 전용 농축기 같은 경우는 사용법도 간편하고 10~100배까지 titer를 높여서 회수 할 수 있습니다. 실험시 주의할 점은 retrovirus는 냉,해동할 경우 titer가 2배 이상 떨어지는 것으로 알려져 있으니 참고하셔야 될 거 같습니다. 또한 retrovirus는 열에 약합니다.
안녕하세요 ~ 지금도 저는 Ultracentrifuge 를 사용하긴하는데 괜찮으시다면 .. 2회하는 조건을 알려주실수있을까요? ㅠ.ㅠ 25000g에서 1시간 30분정도 한번 하는데 아직도 미흡한부분이 많아서요 ..