2010-04-05
org.kosen.entty.User@7b1324c7
권미혜(lovemhbm)
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stable cell line을 만들 때 DNA를 linearization을 시켜서
transfection해 주는 것이 좋다고 알고 있습니다.
왜 그렇게 해주어야 하는 것인지 궁금합니다
그리고 그렇다면 linearization시켜 줄 때 그 vector에서 restriction site가
하나 인 곳이면 어디든 선택 할 수 있는 것인가요??
이제 막 DNA work을 시작하다 보니 기본적인 것일 수도 있는데
모르는게 많습니다^^;;
답변 부탁드립니다~~~~~
- DNA
- linearization
- stable cell line
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
임태규님의 답변
2010-04-15- 0
이유는 간단합니다. 염색체에 유전자를 도입할때 꼭 유전자도입 효율을 높일 필요는 없지만 그래도 염색체에 삽입시키는 확률을 높이기 위해 원형의 프라스미드를 직선화 시키는 것입니다. 실험을 해보시면 아시겠지만 처음에 생각처럼 쉽게 도입이 안됩니다. 요새는 여러가지 좋은 시약이나 방법론이 나와서 이전보다는 쉽게 도입이 됩니다만.... 약제내성마커등을 알아보기 위해 내성유전자를 삽입해서 알아보는등등에 이용하고 있습니다. >stable cell line을 만들 때 DNA를 linearization을 시켜서 >transfection해 주는 것이 좋다고 알고 있습니다. >왜 그렇게 해주어야 하는 것인지 궁금합니다 >그리고 그렇다면 linearization시켜 줄 때 그 vector에서 restriction site가 >하나 인 곳이면 어디든 선택 할 수 있는 것인가요?? >이제 막 DNA work을 시작하다 보니 기본적인 것일 수도 있는데 >모르는게 많습니다^^;; >답변 부탁드립니다~~~~~
감사합니다^^